[发明专利]多肽、其制备方法和用途

说明书

本发明提供了包含SEQ ID NO：1所示氨基酸序列的多肽。本发明还提供了具有棕榈酸或胆固醇修饰的所述多肽的衍生物。所述多肽可抑制2019新型冠状病毒(SARS‑CoV‑2)及多种人冠状病毒感染，并且还可抑制I型人类免疫缺陷病毒(HIV‑1)的感染。本发明所述多肽具有广谱抗病毒活性，并且相对于PEG修饰的多肽具有更高的稳定性，本专利的发明为目前仍在流行的SARS‑CoV‑2及其突变株以及未来有可能爆发的SARS相关病毒以及人类免疫缺陷病毒提供了很好的预防和治疗药物储备。

技术领域

本发明涉及多肽药物领域，尤其是涉及广谱抑制冠状病毒和I型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)的多肽。

背景技术

I型包膜病毒，例如人类免疫缺陷病毒(HIV)和高致病性的人类冠状病毒(HCoV)，包括严重急性呼吸综合症冠状病毒(SARS-CoV)、严重急性呼吸综合症冠状病毒2(SARS-CoV-2)和中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)等，对全球公共卫生和经济构成严重威胁。因此，研发有效的广谱抗包膜病毒药物，防治现有的I型包膜病毒在人类之间传播和未来可能新发的新型I型包膜病毒感染人类成为亟待解决的重要任务。

在I型包膜病毒通过膜融合感染靶细胞的过程中，其主要特征是七重复螺旋序列HR1和HR2形成膜融合的核心结构——六螺旋结构。目前已有研究证明靶向冠状病毒刺突蛋白(S蛋白)的七重复螺旋序列(HR1)的多肽具有广谱抗冠状病毒活性，经过脂质和聚乙二醇(PEG)的进一步修饰后活性得到很大提升，但有文献报道指出PEG修饰的药物可能会引起免疫反应且降低多肽类药物的酶稳定性。因此，本发明为寻找新的多肽修饰策略，发明人通过比较分析发现多种冠状病毒的HR2近融合区(TM区)的氨基酸序列保守，设计了基于TM区优化的HR2-CF区的多肽，并在胆固醇或棕榈酸将多肽锚定在细胞膜之后，用这段保守的氨基酸代替PEG并作为连接，使多肽的主要口袋结合部位与病毒HR1区的口袋区结合，以此思路设计更高稳定性的广谱多肽融合类抑制剂。该发明多肽可有效的在体外抑制多种冠状病毒及I型人类免疫缺陷病毒，具有更高的抗蛋白酶活性及热稳定性，可作为解决当前新冠病毒流行的有力武器，更可以作为防治将来其他新型I型包膜病毒流行的候选药物，具有重要的药物战略储备意义。

发明内容

一方面，本发明提供了一种对冠状病毒和HIV-1具有抑制活性的多肽，其包含选自下组的氨基酸序列：

(1)SEQ ID NO：1；

(2)SEQ ID NO：1被取代、缺失、添加或插入1个或多个氨基酸残基而得到的氨基酸序列；或

(3)与SEQ ID NO：1具有至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、93％、94％或95％序列同一性的氨基酸序列。

一方面，本发明提供了一种多肽，所述多肽为以下多肽：

(1)多肽，其包含SEQ ID NO：1；

(2)多肽，其包含SEQ ID NO：1被取代、缺失、添加或插入1个以上氨基酸残基的氨基酸序列，且所述多肽具有针对冠状病毒的抑制活性；或

(3)多肽，其包含与SEQ ID NO：1具有至少60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、93％、94％或95％同一性的氨基酸序列，且所述多肽具有针对冠状病毒的抑制活性。

另一方面，本发明提供了一种融合蛋白或缀合物，其包含本文所述的多肽。

另一方面，本发明提供了一种核酸，其编码本文所述的多肽或本文所述的融合蛋白。

另一方面，本发明提供了一种载体，其包含本文所述的核酸。

另一方面，本发明提供了一种宿主细胞，其包含本文所述的载体。

另一方面，本发明提供了一种制备本文所述的多肽方法，其包括以下步骤：