[发明专利]一种提高SARS-CoV-2突变毒株ECD抗原免疫原性/抗原三聚体稳定性的方法

说明书

本发明涉及分子疫苗学领域，提供了一种提高SARS‑CoV‑2突变毒株ECD抗原免疫原性/抗原三聚体稳定性的方法及一种免疫原性/抗原三聚体稳定性提高的SARS‑CoV‑2突变毒株ECD免疫原性蛋白/肽。包括但不限于基因组序列编号为GenBank Accession No.MN908947.3的SARS‑CoV‑2毒株、B.1毒株、B.1.1.7毒株或B.1.351毒株的刺突蛋白(S蛋白)的胞外结构域(ECD)，通过引入突变位点和三聚化辅助结构形成的同源三聚体从而提高ECD抗原免疫原性/抗原三聚体稳定性。所述疫苗进一步包含药学上可接受的佐剂。该疫苗组合在小鼠和食蟹猴中显示出优异的免疫原性，可维持长时程的体液免疫和细胞免疫反应。所述重组三聚体蛋白疫苗可用于预防SARS‑CoV‑2感染相关疾病。

技术领域

本发明涉及分子疫苗学领域，涉及一种提高SARS-CoV-2突变毒株ECD抗原免疫原性/抗原三聚体稳定性的方法及一种免疫原性/抗原三聚体稳定性提高的 SARS-CoV-2突变毒株ECD免疫原性蛋白/肽。

背景技术

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)具有较强的传播能力，安全有效的疫苗是控制疫情的最有力的技术手段。根据靶点和技术的不同，疫苗可以被分为以下几类：灭活疫苗、重组蛋白疫苗、病毒载体疫苗、RNA疫苗、减毒活疫苗和病毒样颗粒疫苗等。

SARS-CoV-2和SARS-CoV具有共同的宿主细胞受体蛋白，即血管紧张素转化酶2(ACE2)(Zhou,P.,et al.,Discovery of a novel coronavirus associated with therecent pneumonia outbreak in humans and its potential bat origin.BioRxiv,2020.)。病毒的三聚体刺突蛋白(Spike)同ACE2受体结合后被宿主蛋白酶切割为包含受体结合域(Receptor binding domain,RBD)的S1多肽和负责介导病毒同细胞膜融合的S2多肽(Hoffmann,M.,et al.,SARS-CoV-2 cell entry depends on ACE2 and TMPRSS2 and isblocked by a clinically proven protease inhibitor.Cell,2020.)。S蛋白是病毒包膜的主要成分，在受体结合，融合，病毒进入和宿主免疫防御方面具有重要的作用。S蛋白的RBD区含有主要的中和抗体表位，可刺激B细胞产生针对RBD的高滴度中和抗体。此外，S蛋白还含有丰富的T细胞表位，可诱导 T细胞发生特异性CTL反应，清除病毒感染的细胞。因此，S蛋白是新冠疫苗设计的最关键抗原。目前设计的绝大多数疫苗都选择了S蛋白或RBD结构域蛋白作为核心免疫原。