[发明专利]禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原及其应用

权利要求书

1.一种禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原，其中，所述禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原由禽减蛋综合征病毒Knob-HPF融合蛋白自我组装而成；所述禽减蛋综合征病毒Knob-HPF融合蛋白的蛋白序列从N端到C端依次由禽减蛋综合征病毒Fiber蛋白的Knob区、linker以及幽门螺杆菌Ferritin(HPF)的N端片段组成；所述禽减蛋综合征病毒Fiber蛋白的Knob区为SEQ ID NO:1或其简并序列所编码。

2.根据权利要求1所述的禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原，其中，所述幽门螺杆菌Ferritin的N端片段为SEQ ID NO:2或其简并序列所编码。

3.根据权利要求1所述的禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原，其中，所述禽减蛋综合征病毒Knob-HPF融合蛋白为SEQ ID NO:3或其简并序列所编码。

4.一种禽减蛋综合征病毒亚单位疫苗，其中，所述禽减蛋综合征病毒亚单位疫苗包含权利要求1～3任一项所述的禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原、以及药学上可以接受的载体；所述的禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原的量为致免疫量。

5.根据权利要求4所述的禽减蛋综合征病毒亚单位疫苗，其中，所述禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原含量为HA效价≥1:512；优选地，所述禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原含量为HA效价1:512～1:2048。

6.根据权利要求4所述的禽减蛋综合征病毒亚单位疫苗，其中，所述药学上可以接受的载体为佐剂，所述佐剂包括：(1)矿物油、铝胶佐剂、皂苷、阿夫立定、DDA；(2)油包水乳剂、水包油乳剂、水包油包水乳剂；或(3)丙烯酸或甲基丙烯酸的聚合物、顺丁烯二酸酐和链烯基衍生物的共聚物；以及RIBI佐剂系统、Block co-polymer、SAF-M、单磷酰脂质A、Avridine脂质-胺佐剂、大肠杆菌不耐热肠毒素、霍乱毒素、IMS 1314、胞壁酰二肽、ISA 206、Gel佐剂中的一种或几种；优选地，皂苷为QuilA、QS-21、GPI-0100；

所述佐剂含量为5％-70％V/V，所述佐剂含量优选30％到70％，更优选66％V/V。

7.一种制备权利要求4所述禽减蛋综合征病毒亚单位疫苗，其中，所述方法包括：

步骤(1)克隆表达所述禽减蛋综合征病毒Knob-HPF融合蛋白，将所述表达的禽减蛋综合征病毒Knob-HPF融合蛋白在低温下加入Triton和PEI，混合均匀，升温后用活性炭吸附去除油相，离心后上清中的所述禽减蛋综合征病毒Knob-HPF融合蛋白自我组装，形成所述禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原；

步骤(2)硫酸铵沉淀纯化所述步骤(1)的禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原；以及

步骤(3)将所述步骤(2)的纯化的禽减蛋综合征病毒亚单位纳米颗粒抗原加入到佐剂中，混匀，得到所述禽减蛋综合征病毒亚单位疫苗。

8.根据权利要求4～6任一项所述的禽减蛋综合征病毒亚单位疫苗在制备预防禽减蛋综合征的药物中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其中，所述应用施用动物为鸡和鸭。