[发明专利]一种基于超高效液相色谱联用高分辨质谱快速检测白酒中氨基甲酸乙酯的方法

说明书

本发明公开了一种基于超高效液相色谱联用高分辨质谱快速检测白酒中氨基甲酸乙酯的方法，属于发酵食品中风险物检测筛查技术领域。包括以下步骤：针对白酒样品进行浓缩复溶的前处理，对白酒样品中目标待测物进行提取富集，得到目标待测物样品；基于超高效液相色谱联用高分辨质谱技术，对得到的目标待测物样品进行检测，得到目标待测物样品的一级质谱图与二级质谱图；基于获得的一级与二级质谱图，通过软件提取目标物信息：基于氨基甲酸乙酯标准品建立标准谱图，结合建立的标准谱图与获得的提取目标物信息进行比对，对白酒样品中的氨基甲酸乙酯进行定性与定量。建立了一种高灵敏度、高准确性的白酒中食品安全风险物氨基甲酸乙酯的系统的检测方法。

技术领域

本发明属于发酵食品中风险物检测筛查技术领域，具体涉及一种基于超高效液相色谱联用高分辨质谱快速检测白酒中氨基甲酸乙酯的方法。

背景技术

白酒是我国传统的蒸馏酒，世界六大蒸馏酒之一，以其独特的工艺和风格在世界蒸馏酒中独树一帜，深受广大饮用者的喜爱。目前我国对食品安全日益关注，对白酒食品安全方面的要求也在不断提高。氨基甲酸乙酯(EC)是一种具有潜在致癌作用的化合物，广泛存在于传统发酵食品中。在白酒酿造过程中，部分原辅料中的含氮化合物会在发酵、蒸馏、老化等过程中生成氨基甲酸乙酯，成为白酒中潜在的食品安全风险。目前常用的氨基甲酸乙酯的检测方法主要有气相色谱质谱联用法(GC-MS)与高效液相色谱荧光检测法(HPLC-FLD)。GC-MS为发酵食品中EC检测的常规技术，但该方法样品前处理复杂，样品制备的恰当与否直接关系到检测分析的结果，这在一定程度上限制该技术的应用范围。较之GC-MS，柱前衍生HPLC-FID法分析氨基甲酸乙酯具有较高的灵敏度、准确度和重现性，然而繁琐的样品预处理与衍生试剂稳定性不足的缺陷同样限制了该项技术的发展。高效液相色谱与高分辨率质谱联用技术结合了液相色谱仪有效分离热不稳定性及高沸点化合物的分离能力与质谱仪强大的组分鉴定能力，是一种分离分析复杂有机混合物的有效手段，同时可极大缩短样品前处理时间，满足酒企以及食品安全部门对白酒中氨基甲酸乙酯的准确、快速检测需求。

发明内容

为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种基于超高效液相色谱联用高分辨质谱快速检测白酒中氨基甲酸乙酯的方法，建立了高灵敏度、高准确性的白酒中食品安全风险物氨基甲酸乙酯的系统的检测方法。

为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

本发明公开了一种基于超高效液相色谱联用高分辨质谱快速检测白酒中氨基甲酸乙酯的方法，包括以下步骤：

1)针对白酒样品进行浓缩复溶的前处理，对白酒样品中目标待测物进行提取富集，得到目标待测物样品；

2)基于超高效液相色谱联用高分辨质谱技术，对得到的目标待测物样品进行检测，得到目标待测物样品的一级质谱图与二级质谱图；

3)基于获得的一级与二级质谱图，通过软件提取目标物信息：

4)基于氨基甲酸乙酯标准品建立标准谱图，结合建立的标准谱图与获得的提取目标物信息进行比对，对白酒样品中的氨基甲酸乙酯进行定性与定量。

优选地，步骤1)中进行浓缩复溶的前处理，具体包括：取20-50mL白酒样品至蒸发瓶中，先经旋转蒸发至干，然后经超纯水复溶并定容至1mL，最后使用有机相微孔滤膜过滤，获得目标待测物样品。

进一步优选地，旋转蒸发的温度为70-90℃。

优选地，步骤2)中，基于超高效液相色谱联用高分辨质谱技术对得到的目标待测物样品进行检测中，超高效液相色谱仪的具体监测条件包括：色谱柱条件：Hypersil GOLD100×2.1mm 1.9μm；流动相A为水、甲酸和甲酸铵的混合溶液；其中，甲酸体积占混合溶液体积的0.1％，甲酸铵的浓度为4.0mmol/L，其余为水；流动相B为甲醇、甲酸和甲酸铵的混合溶液；其中，甲酸体积占混合溶液体积的0.1％，甲酸铵的浓度为4.0mmol/L，其余为甲醇；