[发明专利]用于检测早期旋毛虫病的特异性抗原及应用在审
申请号: | 202110578507.5 | 申请日: | 2021-05-26 |
公开(公告)号: | CN113416718A | 公开(公告)日: | 2021-09-21 |
发明(设计)人: | 杨娜;桑晓宇;王彦虎;丁莹莹;冯颖;陈冉 | 申请(专利权)人: | 沈阳农业大学 |
主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C12N15/55;G01N33/573;G01N33/558;G01N33/543 |
代理公司: | 北京知呱呱知识产权代理有限公司 11577 | 代理人: | 杜立军 |
地址: | 110000 辽宁省沈阳市*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 早期 旋毛虫 特异性 抗原 应用 | ||
1.用于检测早期旋毛虫病的蛋白质,包括第一蛋白质和第二蛋白质,所述第一蛋白质为如下(a1)或(a2)的蛋白质:
(a1)氨基酸序列如SEQ ID.1所示的蛋白质;
(a2)将(a1)限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加,且可与绵羊旋毛虫病血清抗体特异性结合的蛋白质;
所述第二蛋白为如下(b1)或(b2)的蛋白质:
(b1)氨基酸序列如SEQ ID.3所示的蛋白质;
(b2)将(b1)限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加,且可与绵羊旋毛虫病血清抗体特异性结合的蛋白质。
2.编码权利要求1所述的第一蛋白质或第二蛋白质的核酸分子。
3.如权利要求2所述的核酸分子,其特征在于,所述核酸分子是编码权利要求1所述的第一蛋白质或第二蛋白质的基因,
编码所述第一蛋白质的基因是如下任一所述的DNA分子:
(c1)编码序列如SEQ ID NO.2所示的DNA分子;
(c2)在严格条件下与(c1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述的第一蛋白质的DNA分子;
(c3)与(c1)或(c2)限定的DNA分子具有90%以上同源性且编码权利要求1所述的第一蛋白的DNA分子;
编码所述第二蛋白质的基因是如下任一所述的DNA分子:
(d1)编码序列如SEQ ID NO.4所示的DNA分子;
(d2)在严格条件下与(d1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述的第二蛋白质的DNA分子;
(d3)与(d1)或(d2)限定的DNA分子具有90%以上同源性且编码权利要求1所述的第二蛋白的DNA分子。
4.权利要求1所述的蛋白质在制备检测绵羊旋毛虫病的免疫层析试纸条中的应用,其中,所述试纸条包括底板、以及位于所述底板上依次固定连接样品垫、结合垫、设有检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水垫,所述检测线靠近所述结合垫一端,所述质控线靠近所述吸水垫一端,所述检测线处包被有权利要求1所述的第二蛋白质;
所述结合垫上包被有微球标记的小鼠IgG抗体和权利要求1所述的第一蛋白质;
所述质控线处包被有山羊抗小鼠IgG抗体。
5.如权利要求4所述的应用,其特征在于,
所述第一蛋白质为在SEQ.ID.1所示的氨基酸序列的氨基末端添加6个组氨酸的蛋白;
所述第二蛋白质为在SEQ.ID.3所示的氨基酸序列的氨基末端添加6个组氨酸的蛋白。
6.如权利要求4所述的应用,其特征在于,
所述检测线处抗原蛋白质的包被浓度为2mg/mL。
7.如权利要求4所述的应用,其特征在于,
所述结合垫中,小鼠IgG标记浓度为1mg/mL,所述第一蛋白质的标记浓度为50μg/ml。
8.如权利要求4所述的应用,其特征在于,
所述山羊抗小鼠IgG的包被浓度为2mg/mL。
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