[发明专利]一株抑菌能力强的丁酸梭菌及其应用

说明书

本发明公开了一株抑菌能力强的丁酸梭菌及其应用，该菌株已于2021年4月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其生物保藏号为：CGMCC NO.22258。本发明所筛选的丁酸梭菌不具有梭菌毒素和肉毒毒素基因，且耐药谱窄，安全性高，对胃肠液、胆盐及高温耐受能力高，且表现出对大肠杆菌、沙门氏菌、摩氏摩根菌、肺炎克雷伯菌等病原菌抑菌能力强的特点，具有良好的动物饲用微生态制剂的应用潜力。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株抑菌能力强的丁酸梭菌及其应用。

背景技术

丁酸梭菌属于梭菌属，是一种严格厌氧的革兰氏阳性芽孢杆菌，周生鞭毛，细胞直或稍弯，内生孢子卵圆，培养过程中发酵产酸产气。该菌是人和动物肠道的正常菌群，也常在环境中发现。丁酸梭菌可产生大量的短链脂肪酸，如丁酸盐和乙酸盐等。研究表明，丁酸可通过抑制NF-κB活化或上调过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达等方式发挥抗炎活性，进而控制病原菌生长，改善肠道菌群紊乱。丁酸梭菌还可增强动物的免疫功能，修复脏器损伤，并提高动物生产性能。此外，丁酸梭菌还能够分解胺类等有害物质，改善养殖环境。

目前，丁酸梭菌已经做为饲料添加剂被广泛使用，其作为抗腹泻类抗生素的替代产品已经在无抗养殖中起到了替抗效果，作用显著。但有些丁酸梭菌菌株可产梭菌毒素或肉毒毒素，如携带E型肉毒毒素的丁酸梭菌被认为是婴儿肉毒中毒或早产儿坏死性小肠结肠炎的原因之一。当前国内丁酸梭菌产品中的菌株特性不一，效果不同，且未对丁酸梭菌进行毒素基因与耐药谱方面的安全性评估。因此，筛选产酸能力高、抑菌能力强、抗逆性好、芽孢转化率高且安全性好的丁酸梭菌是其广泛推广应用的一种重要途径，也对未来规范丁酸梭菌微生态制剂使用具有重要参考价值。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一株抑菌能力强的丁酸梭菌及其应用。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明的第一方面，提供了一株丁酸梭菌（Clostridium butyricum）FW1，该菌株已于2021年04月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号），其生物保藏号为：CGMCC NO.22258。

所述丁酸梭菌（Clostridium butyricum）FW1分离自SPF鸡粪便，具有如下特征：

（1）所述丁酸梭菌菌株FW1在RCM固体培养基上菌落呈白色不透明，边缘不规则。RCM液体中见白色絮状沉淀，生长代谢时产酸产气。

（2）所述丁酸梭菌菌株FW1基因组上不具有梭菌毒素和肉毒素基因，对氧氟沙星、头孢类、青霉素类、新霉素、万古霉素及四环素均敏感，具有良好的应用安全性。

（3）所述丁酸梭菌菌株FW1耐酸能力和耐胆盐能力强，在pH 1.5~3.0孵育1 hr后，其存活率均高于75%以上；在3%胆盐中室温处理12 hr后，其存活率仍可达83%±2.1%。

（4）所述丁酸梭菌菌株FW1对高温耐受力强，在95℃处理5 min时其存活率约19%±2.0%，表明该菌株可以耐受饲料熟化等制备中的高温，可用于饲料添加剂生产。

（5）所述丁酸梭菌菌株FW1对大肠杆菌、沙门氏菌、摩氏摩根菌、肺炎克雷伯菌等均具有良好的杀菌、抑菌能力。其培养24 hr的上清液在37℃作用4~24 hr，可直接杀灭上述病原菌，活菌数可从10⁷ CFU/mL降至0~100 CFU/mL。

本发明的第二方面，提供丁酸梭菌（Clostridium butyricum）FW1的发酵液、菌悬液和/或上清液。