[发明专利]一种人乳头瘤病毒11型L1蛋白的抗体及其制备方法

说明书

本发明提供了一种可特异性识别人乳头瘤病毒11型的L1蛋白(HPV11L1)和/或VLP(HPV11VLP)的单克隆抗体。本发明提供的特异性单克隆抗体与其它8种型别HPV(HPV6、16、18、31、33、45、52、58)L1蛋白和/或VLP无明显交叉反应，具有高特异性，高灵敏度，高准确率、高安全性的优点。可以用于准确检测疫苗种中HPV11的L1蛋白和/或VLP有生物活性疫苗的含量，在临床检测和疫苗生产过程中将会得到广泛应用。

技术领域

本发明涉及分子病毒学和免疫学领域，更具体地，本发明涉及人乳头瘤病毒11型杂交瘤细胞系，及一种人乳头瘤病毒11型L1蛋白和/或VLP的单克隆抗体的制备方法，及其制备的诊断试剂盒。

背景技术

人类乳头瘤病毒(Human Papillomavirus，简称HPV)是一组无包膜的小DNA病毒，感染人皮肤及粘膜上皮组织，可诱发产生疣状增生乃至引发良性或恶性肿瘤。HPV亚型极多，目前已分离出130余种，不同的型别引起不同的临床表现。根据其与肿瘤发生的关系可分为高危型HPV(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58等)和低危型HPV(HPV6， 11，40，42，43，44，54等)。

低危型不整合于细胞基因组中，主要引起皮肤黏膜的疣状增生，表现为尖锐湿疣、扁平疣等良性病变。尖锐湿疣是国家卫生部规定要求监测的八大性传播疾病之一，它的发病率仅次于淋病，由于病情易反复发作，传染性极强，已经成为严重危及人们正常生活的常见性病之一。根据流行病学调查肛生殖器粘膜的HPV例如HPV6、11引起的病变占了总数的90％左右。因此，研制HPV11型疫苗将起到良好的预防尖锐湿疣等疾病病变的作用。

HPV的主要衣壳蛋白L1具有自组装为空心病毒样颗粒(Virus-Like Particle，VLP)的特征。 HPVVLP是由72个主要衣壳蛋白L1的五聚体构成的20面体立体对称结构。VLP疫苗可通过分子生物学技术，表达病毒的一个或多个结构蛋白，这些结构蛋白具有天然的自主装配能力，可形成与天然病毒颗粒相似的空间构型和抗原表位，但无病毒核酸，免疫原性强，无感染性，不存在灭活不完全或毒力回复的风险，并且表面有高密度的病毒抗原，保存了构象表位，可通过和全病毒疫苗一样的途径呈递给免疫细胞，有效诱导机体免疫系统产生免疫保护反应，诱导高滴度的中和抗体。

在HPV疫苗研发过程中，需要进行型别鉴定、抗原含量检测和体外效力测定。其方法均可以采用双抗体夹心法ELISA。因此，在疫苗研究中，单克隆抗体是疫苗抗原质量控制的重要工具，尤其是具有特异性和中和活性的抗体，在疫苗研发中具有不可替代的重要作用。本发明提供了一种可针对HPV11的特异性和中和活性的单克隆抗体，利用其中的两株制备的 ELISA检测试剂盒可特异性地用于快速鉴别HPV11 L1蛋白，可广泛应用于临床检测和目前疫苗厂家生产疫苗过程中的质检，对HPV11型疫苗的研发和尖锐湿疣等疾病病变的预防具有重要意义。

发明内容

本发明第一个方面提供了能够识别HPV11的L1蛋白和/或VLP的单克隆抗体以及产生该抗体的杂交瘤细胞系。

本发明第二个方面提供了一种单克隆抗体的制备方法。

本发明第三个方面提供了一种HPV11的L1蛋白和/或VLP的抗原检测试剂盒的制备方法。

本发明第四个方面提供了一种用于检测HPV11的双抗体夹心ELISA试剂盒。

本发明是通过如下技术方案实现：