[发明专利]一种与肾细胞癌相关的环状RNA及其应用

说明书

一种与肾细胞癌相关的环状RNA及其应用，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明环状RNA ciRS‑7在肾细胞癌组织中特异性表达上调，可以作为肾细胞癌的诊断标志物；同时，高表达ciRS‑7与预后不良相关，可以作为肾细胞癌患者的预后标志物；本发明成功合成了PBAE/si‑ciRS‑7复合物纳米材料，可以作为肾细胞癌的分子靶向药物。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种与肾细胞癌相关的环状RNA及其应用。

背景技术

肾细胞癌(RCC)是起源于肾脏的泌尿系统常见恶性肿瘤，其发病率仅次于前列腺癌及膀胱癌，约占全身恶性肿瘤的3％，占肾脏恶性肿瘤的80％～85％，并且近十年来其发病率呈上升趋势。据统计，2018年全球新发病例超过40万，死亡病例超过17万。在我国，2015年肾癌的发病率为66.8人/10万人，死亡率为23.4人/10万人。肾细胞癌具有较高的恶性转移倾向，据报道，初诊为肾细胞癌的患者中约有25％～30％出现远处转移，其余约一半的患者在术后随访中发现了转移性病变。由于肾细胞癌对放疗、化疗不敏感，因此靶向治疗成为肾癌治疗的新的方向，并且越来越多的靶向药物运用于临床中。虽然靶向治疗对肾癌有一定的疗效，但是目前研究显示靶向治疗的效果仍有限。一方面靶向治疗药物存在明显毒副作用，另一方面靶向治疗最终会发展为药物抵抗。因此，临床上迫切需要用于肾细胞癌早期诊断和监测的生物标志物，研究肾细胞癌的转移和进展的生物机制，早期识别肾细胞癌转移机制有助于更准确地预测临床结果和研发靶向药物。

聚-β氨基酯[Poly(β-amino ester)s,PBAE]类聚合物分子是一类新近合成的高效聚合物基因载体材料。它含有伯胺、仲胺、叔胺及可水解的酯键，因此其细胞亲和更高、转染效率更好。此外，PBAE能够通过改变其亚基位置而具备对某种细胞的特异性亲和力，例如选择性转染肿瘤细胞，进而避免损伤周围正常组织。上述这些优点都使得该类聚合物成为构建聚合物基因传递纳米颗粒用以治疗肿瘤的理想选择。

环状RNA(circRNAs)是一种新发现的非编码RNA，在许多物种中普遍存在。circRNAs通过特殊的选择性剪切从外显子或内含子中产生，具有共价闭环结构，没有末端5′端和3′聚A尾。由于这种特殊的闭环结构，circRNAs在核酸外切酶RNase R的降解下表现出比线性RNAs更大的稳定性。circRNAs最初被认为是剪接错误的副产品。然而，高通量测序和生物信息学分析的广泛使用表明，circRNAs是内源性的、丰富的、和保守的表达在哺乳动物细胞内，这表明它们很可能有特定的生物功能。有研究显示circRNA可以通过以下五种方式发挥重要功能：作为miRNA海绵抑制其功能；作为转录和翻译调节因子；影响pre-mRNAs的选择性剪接；与RBPs相互作用以调节基因表达；具有编码蛋白质的潜力。目前，有大量研究报道circRNA参与肿瘤的发生发展过程，其生物学特性使其可以作为肿瘤诊断和预后的生物标志物及精准治疗的靶点。虽然在以往的研究中，肾细胞癌组织样本中的circRNA已被报道，但circRNA对于肾细胞癌分子诊断的意义及治疗应用尚不清楚。因此急需寻找新的circRNAs，并探讨其对肾细胞癌的生物学效应，以获得用于诊断标志和治疗的潜在靶点。

发明内容

解决的技术问题：针对目前诊断肾细胞癌预后和治疗效果不佳的技术问题，本发明提供一种与肾细胞癌相关的环状RNA及其应用。通过基因芯片筛查与肾细胞癌相关的环状RNA生物标志物，选择差异表达明显的ciRS-7，在肾癌组织和正常组织中检测其表达差异，通过检测该circRNA的表达水平，判断受试者是否与肾细胞癌的预后相关，为临床上判断肾癌是否发生转移提供支持。此外，通过纳米技术构建基于ciRS-7的PBAE/si-ciRS-7纳米材料复合物作为肾细胞癌的分子靶向药物。

技术方案：一种与肾细胞癌相关的环状RNA，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

上述环状RNA作为肾细胞癌诊断标志物在制备试剂盒中的应用。

上述环状RNA在制备靶向药物中的应用。