[发明专利]一种核酸适配体及其在检测免疫抑制剂中的应用

说明书

本发明涉及一种核酸适配体及其在检测免疫抑制剂中的应用，属于生物检测技术领域。本发明提供了一种核酸适配体，所述核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3中的至少一种，其中：核苷酸序列为SEQ ID NO:1的核酸适配体可与他克莫司特异性结合，且此核酸适配体与他克莫司的亲和力极高；核苷酸序列为SEQ ID NO:2的核酸适配体可与环孢素A特异性结合，且此核酸适配体与环孢素A的亲和力极高；核苷酸序列为SEQID NO:3的核酸适配体可与霉酚酸酯特异性结合，且此核酸适配体与霉酚酸酯的亲和力极高。

技术领域

本发明涉及一种核酸适配体及其在检测免疫抑制剂中的应用，属于生物检测技术领域。

背景技术

器官移植(Organ transplantation)是治疗终末期器官功能衰竭的有效医疗手段，然而，对于接受供体移植的患者来说，术后的免疫排斥反应是影响移植肾存活时间，及患者术后生活质量的重要因素。免疫抑制剂的使用可在一定程度上延长移植肾的存活时间，改善移植患者术后的生活质量。但是，免疫抑制剂的使用会造成患者免疫功能低下，从而又易导致患者受感染的风险上升。因此，如何正确的使用免疫抑制剂，维持血药浓度稳定，是保障移植术后患者的预后的重要环节。

他克莫司(Tacrolimus，TAC)、环孢素A(cyclosporin A，CsA)和霉酚酸酯(Mycophenolate mofetil，MMF)是临床上肾移植术后常用的免疫抑制剂，常以联合用药方式用于术后免疫抑制。目前，对于这三种药物的血药浓度检测方法主要集中于色谱法(记载于文献“王磊等.环孢素A血药浓度监测相关实验室检测研究进展.中华临床实验室管理电子杂志7.02(2019):65-70.”中)和免疫法(记载于文献“宋爱凤.他克莫司血药浓度检测方法的研究进展[J].现代药物与临床,2019,34(11):3497-3500.”中)。其中，色谱法虽然检测的准确度较高，但所需设备昂贵，且样本前处理较为复杂；而免疫法虽然操作相对简单，且对设备平台、人员专业素质要求较低，但准确度较低，且存在交叉免疫反应，结果易受外界因素影响。另外，如今市场上对这三种药物浓度的商用检测试剂盒，也只能对其单独一种药物进行检测，难以同时满足三种药物浓度的快速检测要求。

发明内容

为解决上述缺陷，本发明提供了一种核酸适配体，所述核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3中的至少一种。

在本发明的一种实施方式中，所述核酸适配体上修饰有荧光标记。

在本发明的一种实施方式中，所述核酸适配体的5′端修饰有荧光标记。

在本发明的一种实施方式中，当核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:1时，所述荧光标记为FAM标记；当核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:2时，所述荧光标记为VIC标记；当核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:3时，所述荧光标记为ROX标记。

本发明还提供了一种用于检测免疫抑制剂的产品，所述产品包括氧化石墨烯以及上述核酸适配体，或者，所述产品包括纳米金以及上述核酸适配体，或者，所述产品包括氧化石墨烯、纳米金以及上述核酸适配体。

在本发明的一种实施方式中，所述产品为试剂盒。

在本发明的一种实施方式中，所述氧化石墨烯为单层氧化石墨烯分散液。

在本发明的一种实施方式中，所述免疫抑制剂包括他克莫司、环孢素A和霉酚酸酯中的至少一种。

在本发明的一种实施方式中，当免疫抑制剂为他克莫司时，所述核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:1；当免疫抑制剂为环孢素A时，所述核酸适配体的核苷酸序列为SEQID NO:2；当免疫抑制剂为霉酚酸酯时，所述核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO:3。

本发明还提供了一种检测样本中免疫抑制剂浓度的方法，所述方法包含如下步骤：