[发明专利]关苍术中一种萜类化合物的制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种从关苍术中获得的新的萜类化合物及其制备方法和抗胃癌方面的应用，其分子式为C₃₀H₄₄O₄，分子量为468。该化合物由乙醇冷浸提取，采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和半制备型高效液相色谱等方法分离纯化而得到，化学结构通过一维、二维核磁共振技术以及质谱手段确认和阐明。通过CKK‑8实验结果表明，该化合物对人源性胃癌MGC‑803细胞有抑制作用。本发明从关苍术中分离制备得到的萜类化合物结构新颖，可作为研制新型抗肿瘤药物的先导化合物，也有望进一步作为治疗癌症的临床药物。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种从关苍术中分离、纯化得到的萜类化合物及其制备方法和在制备抗胃癌药物方面的应用。

背景技术

关苍术，又名关东苍术、枪头菜、东苍术，为菊科苍术属多年生草本植物，生于山坡、柞林、灌丛间。在我国主产于东北地区，日本、朝鲜、俄罗斯也有分布。关苍术味辛、苦，性温，归脾、胃、肝经。《中华食疗本草》记载其根茎可入药，具有健脾、燥湿、排汗、明目等功效。现代研究表明，关苍术有抗胃溃疡、降血糖、抗炎、抗心律失常等作用。在民间，关苍术也经常被作为治疗胃溃疡以及消化系统疾病的药物使用，由于治疗效果很好，所以得到广泛地应用。根据文献报道，关苍术中主要活性成分类型有萜类、聚乙炔类、糖类等。

胃癌是常见的恶性肿瘤之一，居消化道癌瘤的首位。现代医学治疗胃癌的手段，主要是手术治疗结合放化疗，其中放化疗所带来的副作用和后遗症让许多患者难以接受。因此癌症的治疗开始偏向于现代医学手段与天然药物治疗相结合的方式。目前，国内外对关苍术中抗胃癌活性的次生代谢产物的提取分离未见报道，因此从关苍术中提取分离此类活性成分，可提升关苍术的应用价值和经济价值，对关苍术的综合开发利用具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的萜类化合物及其制备方法和医药用途，以进一步提高关苍术资源的开发及利用，扩大治疗肿瘤药物的来源。

为了达成上述目的，本发明提供了一种从关苍术中分离得到的具有抗胃癌活性的萜类化合物关苍术萜烯酸Ⅰ，其化学结构式如下：

本发明还提供了该萜类化合物的制备方法：依次通过乙醇冷浸提取、有机溶剂萃取、正相硅胶柱色谱分离和HPLC制备纯化得到。具体制备步骤如下：

（1）乙醇冷浸提取：取关苍术低温烘干，适当粉碎，然后加入95%乙醇（药材重量与乙醇体积配比为1:6～1:10）冷浸提取3次，每次7 d，将所得提取液合并、浓缩；向上述乙醇浓缩液加入等体积纯净水，搅拌均匀，并于10℃下静置12 h，抽滤除去沉淀，滤液浓缩至不含醇，得到乙醇粗提物浸膏；

（2）有机溶剂萃取：将步骤（1）所得乙醇粗提物浸膏用水分散形成混悬液，再用与混悬液等体积的二氯甲烷反复萃取，合并萃取液，回收溶剂得到二氯甲烷萃取物；

（3）正相硅胶柱色谱分离：取步骤（2）所得二氯甲烷萃取物进行正相硅胶柱色谱分离。依次采用体积配比依次为25:1和8:1的二氯甲烷-甲醇混合溶剂进行梯度洗脱，每一个比例洗脱8个柱体积，将体积配比为8:1的二氯甲烷-甲醇混合溶剂洗脱部分减压回收得到分离产物；

（4）HPLC制备纯化：将步骤（3）所得粗品通过制备型HPLC进行制备纯化，用体积配比为35:1的正己烷-乙酸乙酯混合溶剂为流动相，洗脱速率为3 mL/min，保留时间t_R=17.5min～18 min阶段内收集馏分，回收干燥得到该化合物纯品。

本发明还提供了关苍术萜烯酸Ⅰ在制备预防和治疗肿瘤药物方面的应用。在体外细胞毒实验中能够抑制人源性胃癌MGC-803细胞的增殖，具有细胞毒作用，可以作为制备预防和治疗人胃癌药物的来源。