[发明专利]一种标签蛋白及其编码基因、重组载体与应用

说明书

本申请公开了一种标签蛋白及其编码基因、重组载体与应用。所述标签蛋白为如下A1)或A2)或A3)所示的蛋白质：A1)氨基酸序列为SEQID NO.2的蛋白质；A2)氨基酸序列为SEQ ID NO.2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加若干氨基酸残基后得到的与SEQ ID NO.2同一性在70％或以上，且与A1)具有相同功能的蛋白质；A3)由A1)和/或A2)进行串联重复、拼接、融合或截短而生成的且与A1)具有相同功能的蛋白质。所述标签蛋白通用性广、助溶性强、分子量适中，可以提高蛋白异源表达的溶解性及活性。

技术领域

本申请涉及一种标签蛋白及其编码基因、重组载体与应用，属于生物技术领域。

背景技术

原核表达是最便利、最经济快速获得大量活性蛋白的方法，然而其应用也有很多限制。比如缺少修饰、需要去除内毒素、外源蛋白易降解、表达中很多蛋白不能很好的折叠从而严重聚集或者产生包涵体等，其中包涵体或可溶性差是最为棘手的问题。包涵体的产生一般是因为蛋白表达过程中没有很好的折叠、疏水区暴露从而引起大量聚集产生沉淀，表达出的目标蛋白为无活性的不溶性颗粒。最近也有研究表明在大量聚集后有β淀粉样蛋白结构从聚集中产生，并导致决定性的包涵体。

为了解决包涵体问题人们已经采取了许多办法，如降低表达速度、加入额外的分子伴侣共表达、添加信号肽分泌表达、包涵体变复性、开发助溶标签与目标蛋白融合表达等，目前常用的标签蛋白有GST、Trx、Sumo、MBP、NusA等。然而，上面介绍的几种目前主流的标签在助溶效果上很不相同，且都各有其他方面的优缺点，还有一些蛋白使用主流助溶标签都无明显效果。因此急需开发新的助溶标签，这种新的助溶标签不仅具有显著的助溶效果而且具有较高的普适性、分子量还不能太大以免影响目标蛋白产量。

发明内容

根据本申请的一个方面，提供一种标签蛋白，所述标签蛋白通用性广、助溶性强、分子量适中，可以提高蛋白异源表达的溶解性及活性。

一种标签蛋白，所述标签蛋白为如下A1)或A2)或A3)所示的蛋白质：

A1)氨基酸序列为SEQ ID NO.2的蛋白质；

A2)氨基酸序列为SEQ ID NO.2的氨基酸序列经过取代和/或缺失和/或添加若干氨基酸残基后得到的与SEQ ID NO.2同一性在70％或以上，且与A1)具有相同功能的蛋白质；

A3)由A1)和/或A2)进行拼接而生成的且与A1)具有相同功能的蛋白质。

上述标签蛋白中，所述同一性在70％或以上可为同一性在70％、73％、75％、78％、80％、81％、82％、85％、86％、88％、90％、91％、92％、95％、96％、98％或99％以上，或同一性为100％。

可选地，所述标签蛋白具有在蛋白异源表达中提高目标蛋白溶解性和/或活性的功能。

根据本申请的另一个方面，提供一种DNA分子，所述DNA分子编码上述任一项所述的标签蛋白。

可选地，所述DNA分子为如下a1)或a2)或a3)或4)所示的DNA分子；

a1)编码区包括SEQ ID NO.4的DNA分子；

a2)核苷酸序列是SEQ ID NO.4的DNA分子；

a3)与a1)或a2)限定的核苷酸序列具有70％或以上同一性，且编码权上述任一项所述标签蛋白的DNA分子；

a4)在严格条件下与a1)或a2)限定的核苷酸序列杂交，且编码上述任一项所述标签蛋白的DNA分子。

在上述DNA分子中，所述具有70％或以上同一性可为具有至少70％、73％、75％、78％、80％、81％、82％、85％、86％、88％、90％、91％、92％、95％、96％、98％、99％或100％的同一性。