[发明专利]以CD99为靶点的嵌合抗原受体及其应用

权利要求书

1.一种嵌合型抗原受体，其特征在于，所述受体含有信号肽、单链抗体ScFv、strepII、CD8 hinge、CD28跨膜区、CD28胞内结构域、胞内共刺激域4-1BB、和CD3ζ链，其中所述单链抗体ScFv的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.如权利要求1所述的嵌合型抗原受体，其特征在于，所述受体在CD3ζ链的C端还拼接有F2A肽、IL-7、F2A肽和CCL19。

3.如权利要求2所述的嵌合型抗原受体，其特征在于，所述F2A肽的氨基酸序列如SEQID NO.25所示，所述IL-7的氨基酸序列如SEQ ID NO.27所示，所述CCL19的氨基酸序列如SEQ ID NO.29所示。

4.如权利要求1所述的嵌合型抗原受体，其特征在于，所述单链抗体ScFv的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

5.一种重组嵌合型抗原受体的基因载体，其特征在于，所述载体以PTK881-EF1α载体为骨架，插入如权利要求1-4任一所述的嵌合型抗原受体编码核苷酸序列的慢病毒载体。

6.一种表达嵌合型抗原受体的免疫细胞，其特征在于，由权利要求1-4任一所述的嵌合型抗原受体的编码核苷酸序列或权利要求5所述的重组嵌合型抗原受体的基因载体转染免疫细胞得到，所述免疫细胞选自脐带血、外周血或iPSC来源的T细胞、NK细胞、NKT细胞、αβT细胞、γδT细胞、CD4+T细胞，CD8+T细胞。

7.权利要求1-4任一项所述的嵌合型抗原受体、权利要求5所述的重组嵌合型抗原受体基因载体、权利要求6所述的表达嵌合型抗原受体的免疫细胞的用途，其特征在于，包括用于制备治疗、预防、诊断肿瘤的药物或试剂盒。

8.如权利要求7所述的用途，其特征在于，所述肿瘤选自尤文肉瘤、急性淋巴瘤/白血病、急性髓系白血病、恶性神经胶质瘤、乳腺癌。

9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述肿瘤为急性T细胞淋巴白血病。

10.一种如权利要求6所述的表达嵌合型抗原受体的免疫细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将分离得到的免疫细胞激活2-15天后，利用权利要求5所述的重组嵌合型抗原受体的基因载体感染免疫细胞从而获得表达嵌合型抗原受体的免疫细胞，所述免疫细胞为T细胞。