[发明专利]量子点免疫荧光检测试剂条包含其的试剂盒及其应用

说明书

本发明提供了一种量子点免疫荧光检测试剂条包含其试剂盒及其应用，涉及生物检测技术领域。上述试剂条采用量子点免疫层析技术，将新型冠状病毒N蛋白作为检测抗原，可对疑似新型冠状病毒感染者的生物样本进行检测，上述试剂条对新型冠状病毒检测超灵敏，其LOD值为15TCID50/mL，对应核酸CT值34.25；经检测判别，当CT≤35时，本发明试剂盒的阳性符合率96.06％，阴性符合率100.00％，总符合率98.56％；当样本CT≤38时，本发明试剂盒的阳性符合率89.58％，阴性符合率100.00％，总符合率95.88％。由上述试剂条制得的试剂盒具有特异度高、无交叉污染以及可定量检测的优势。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，尤其是涉及一种量子点免疫荧光检测试剂条包含其的试剂盒及其应用。

背景技术

现有核酸检测和CT影像学是新冠病毒感染者筛查的主要方法。其中，核酸检测假阴性率高、操作人员和场地设备要求高、检测时间长。CT检查其它病毒性肺炎鉴别性诊断难、易交叉感染、卫生经济学可操作性不强。更为重要的是，以上两种方法均无法实现现场快速、大规模筛查，现阶段急需开发灵敏度更高、可信度更强、操作更便捷的快速检测产品。

现有临床使用的新型冠状病毒抗体检测方法主要有酶联免疫法、化学发光法以及胶体金法。酶联免疫法和化学发光法可进行定量检测，是抗体检测的主要方法。胶体金法是一种即时检测(point-of-care testing，POCT)方法，具有快速、检测场地不受限制以及操作者要求低的优点，但胶体金法只能定性检测，与定量检测方法比较灵敏度和特异度欠佳。

目前，国内外商业化ELISA、化学发光法和胶体金法COVID-19抗体诊断产品主要包括总抗体以及IgM、IgG抗体联合检测试剂，然而各项检测方法特异性在96.6～99.7％之间，敏感性在66％～97.8％之间，该结果表明0.3％～3.4％被检者错误诊断为新冠肺炎，2.2％～34％的新冠肺炎患者漏检。同时，现有COVID-19抗体检测试剂早期检出率低，无法达到精准防疫的目标。在低流行率人群中，现有的抗体测试可能产生和真实阳性结果一样多甚至更多的假阴性结果，造成不必要的人力物力浪费。

因此，研究开发一种量子点免疫荧光检测试剂盒，以提高早期诊断率和降低假阳性率，其临床意义重大。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种量子点免疫荧光检测试剂条，所述的试剂条采用量子点免疫层析技术，将新型冠状病毒N蛋白作为检测抗原，使用量子点荧光微球标记新型冠状病毒N蛋白抗体形成量子点特异性蛋白复合物，随后对患者的鼻咽拭子或口咽拭子进行检测。

本发明的第二目的在于提供一种量子点免疫荧光检测试剂盒，所述试剂盒包括上述量子点免疫荧光检测试剂条。

本发明的第三目的在于提供一种量子点免疫荧光检测试剂条或上述量子点免疫荧光检测试剂盒在新型冠状病毒检测中的应用。

本发明提供的一种量子点免疫荧光检测试剂条，所述试剂条包括底板，底板上设置有样品垫、量子点标记物结合垫、层析反应膜和吸水纸；

其中，所述量子点标记物结合垫吸附有量子点特异性蛋白复合物，所述量子点特异性蛋白复合物主要由量子点和特异性蛋白偶联得到，所述特异性蛋白包括新型冠状病毒N蛋白；

所述层析反应膜上设置有检测线，所述检测线含有新型冠状病毒N蛋白抗体。

进一步的，所述层析反应膜设置于底板的中间，所述量子点标记物结合垫和样品垫依次搭接在层析反应膜的一端上，所述吸水纸搭接在层析反应膜的另一端上。

进一步的，所述新型冠状病毒N蛋白的氨基酸序列如Seq No.01所示。

进一步的，所述层析反应膜上还设置有质控线。

进一步的，所述质控线含有羊抗兔IgG抗体。