[发明专利]一种测定罗红霉素对小麦发芽影响的方法

权利要求书

1.一种测定罗红霉素对小麦发芽影响的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)配制营养液：Ca(NO₃)₂·4H₂O 1mM、KNO₃ 1.25mM、NH₄NO₃ 0.25mM、KH₂PO₄ 0.25 mM、MgSO₄·7H₂O 0.5 mM、Fe-EDTA 0.125 mM、KI 6.25×10^-6 mM、HBO₃ 1.25×10^-4 mM、MnSO₄ 1.85×10^-4 mM、ZnSO₄ 1.25×10^-5 mM、Na₂MoO₄ 2.5×10^-7 mM、CuSO₄ 4×10^-8 mM、CoCl₂·6H₂O 2.5×10^-8 mM；

(2)配制罗红霉素溶液：设置大环内酯类抗生素罗红霉素，浓度梯度为0、0.1、0.5、1、5、10 mg·L^-1，分别用营养液定容；

(3)小麦种子消毒后，一部分添加罗红霉素溶液用于测定发芽率，其余使用去离子水对小麦种子进行催芽；

(4)选取一部分催芽1天后露白的小麦种子放入培养皿，添加罗红霉素溶液进行培养，4天后测定罗红霉素对小麦种子的根长以及芽长的影响，其余小麦种子继续使用去离子水培养；

(5)将配制罗红霉素溶液倒入水培盒中，将去离子水培养3天后发芽出根的小麦种子根系插进水培盒中并固定小麦种子，水培盒放入光照培养箱中连续培养8天；

(6)测定小麦幼苗的生长发育情况：培养小麦8天后测定小麦幼苗的鲜重、干重、地上部长度、地下部长度，确定小麦幼苗生物量大小。

2.一种测定罗红霉素对小麦发芽影响的方法，其特征在于，步骤(3)中所述消毒、催芽的具体方法如下：选取颗粒饱满、大小相同的小麦种子，以20%的次氯酸钠溶液浸泡小麦种子进行消毒20min再用去离子水反复冲洗小麦种子数次后，在9cm直径的玻璃培养皿中放三层滤纸，加入罗红霉素浓度梯度为0、0.1、0.5、1、5、10 mg·L^-1的营养液6mL，放入10粒大小均匀的小麦种子，其余小麦种子均匀放在铺满滤纸的铝盘中，加入去离子水使之浸没小麦种子底部，盖上润湿的滤纸，放入24-26℃的恒温培养箱中催芽。

3.一种测定罗红霉素对小麦发芽影响的方法，其特征在于，步骤(4)中所述培养的具体方法如下：在9cm直径的玻璃培养皿中放三层滤纸，加入罗红霉素浓度梯度为0、0.1、0.5、1、5、10 mg·L^-1的营养液6mL，将铝盘中10粒已露白的小麦种子均匀放于玻璃培养皿中，保持小麦种子胚根末端和生长方向呈直线，盖好玻璃培养皿，置于恒温培养箱中24-26℃暗处培养96h，同时设置一个对照处理，每个处理设置3个平行。

4.一种测定罗红霉素对小麦发芽影响的方法，其特征在于：步骤(5)中所述将水培盒放入光照培养箱中连续培养8天，培养期间每两天更换水培盒中的营养液，光照培养箱中培养条件为24-26℃温度、6000lx光照强度下培养13小时，19-21℃温度无光照下培养11小时。

5.一种测定罗红霉素对小麦发芽影响的方法，其特征在于：步骤(6)中所述测定方法是用直尺测得小麦幼苗根长以及根上部分长度；用天平分别称量小麦幼苗鲜重，并做好标记将称量完鲜重的小麦幼苗放入75℃烘箱中烘至恒重后称量其干重。