[发明专利]细胞染色的质控品制备方法有效
| 申请号: | 202110429098.2 | 申请日: | 2021-04-20 |
| 公开(公告)号: | CN113049344B | 公开(公告)日: | 2022-02-01 |
| 发明(设计)人: | 张磊 | 申请(专利权)人: | 深圳天烁生物科技有限公司 |
| 主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N33/68;G01N33/574 |
| 代理公司: | 深圳市恒程创新知识产权代理有限公司 44542 | 代理人: | 孔德丞 |
| 地址: | 518000 广东省深圳市龙华区龙华街道清华社*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 细胞 染色 质控品 制备 方法 | ||
1.一种细胞染色的质控品制备方法,其特征在于,步骤如下:
(1)将E-Cadherin免疫磁珠与结合缓冲液混合,获得E-Cadherin免疫磁珠工作液,将CEA免疫磁珠与结合缓冲液混合,获得CEA免疫磁珠工作液,将CD45免疫磁珠与结合缓冲液混合,获得CD45免疫磁珠工作液;
(2)将所述E-Cadherin免疫磁珠工作液、所述CEA免疫磁珠工作液、所述CD45免疫磁珠工作液、白细胞和肺癌循环肿瘤细胞进行混合,得到第一混合液;
(3)去除所述第一混合液中的液体,加入固定液固定,得到肺癌循环肿瘤细胞的质控品;
所述E-Cadherin免疫磁珠通过E-Cadherin抗体特异性地结合肺癌循环肿瘤细胞,所述CEA免疫磁珠通过CEA抗体特异性地结合肺癌循环肿瘤细胞,所述E-Cadherin免疫磁珠、所述CEA免疫磁珠与所述肺癌循环肿瘤细胞形成磁珠-抗体-细胞复合物;
所述E-Cadherin免疫磁珠与所述CEA免疫磁珠的数量比为大于或等于3:4,且小于或等于4:3;所述E-Cadherin免疫磁珠、所述CEA免疫磁珠的数量和与所述CD45免疫磁珠的数量的比为大于或等于4:3,且小于或等于5:2;所述白细胞与所述肺癌循环肿瘤细胞的数量比为大于或等于1:10,且小于或等于10:1。
2.一种细胞染色的质控品制备方法,其特征在于,步骤如下:
(1)将E-Cadherin免疫磁珠与结合缓冲液混合,获得E-Cadherin免疫磁珠工作液,将CEA免疫磁珠与结合缓冲液混合,获得CEA免疫磁珠工作液,将CD45免疫磁珠与结合缓冲液混合,获得CD45免疫磁珠工作液;
(2)将所述E-Cadherin免疫磁珠工作液、所述CEA免疫磁珠工作液与肺癌循环肿瘤细胞进行混合,得到第二混合液,将所述CD45免疫磁珠工作液与白细胞混合,得到第三混合液;
(3)分别去除所述第二混合液和所述第三混合液中的液体,并加入固定液固定,得到肺癌循环肿瘤细胞的质控品;
所述E-Cadherin免疫磁珠通过E-Cadherin抗体特异性地结合肺癌循环肿瘤细胞,所述CEA免疫磁珠通过CEA抗体特异性地结合肺癌循环肿瘤细胞,所述E-Cadherin免疫磁珠、所述CEA免疫磁珠与所述肺癌循环肿瘤细胞形成磁珠-抗体-细胞复合物;
所述E-Cadherin免疫磁珠与所述CEA免疫磁珠的数量比为大于或等于3:4,且小于或等于4:3。
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