[发明专利]一种利用根瘤菌接种缓解阿特拉津对大豆药害作用的方法

说明书

一种利用根瘤菌接种缓解阿特拉津对大豆药害作用的方法，本发明涉及农业微生物应用领域。本发明要解决现有黑土区残留阿特拉津对大豆药害作用严重的技术问题。方法：将根瘤菌菌株活化培养，制备根瘤菌菌液；种植大豆种子，当大豆幼苗长出第一对真叶后，向大豆幼苗的根部周围注入步骤一所述的根瘤菌菌液，继续培养。本发明方法施加根瘤菌后，能明显缓解阿特拉津对大豆生长产生的胁迫作用。本发明用于缓解阿特拉津对大豆药害作用。

技术领域

本发明涉及农业微生物应用领域。

背景技术

玉米和大豆轮作是我国东北地区应用广泛的可持续种植方式，可以有效保持土壤肥力。但在实际生产中，玉米的常年连作，除草剂过量施用导致阿特拉津在土壤中残留量越来越高，对下茬大豆伤害也越来越严重。大豆是一类对阿特拉津胁迫较为敏感的作物，豆科植物与根瘤形成的固氮系统对于地球的生态系统以及农业生产具有重大的意义。国外通过大面积接种根瘤菌充分发挥大豆的生物固氮功能，取得了明显的经济效益和生态效益。然而我国大豆生产中普遍施用氮肥，这不仅降低了肥料利用率也直接增加了生产成本。因此推广根瘤菌及优化根瘤菌投加方式在我国黑土区大豆生产上的应用具有广阔的前景。但目前尚缺少针对缓解黑土区残留阿特拉津对大豆药害的根瘤菌施加方法。

发明内容

本发明要解决现有黑土区残留阿特拉津对大豆药害作用严重的技术问题，而提供一种利用根瘤菌接种缓解阿特拉津对大豆药害作用的方法。

一种利用根瘤菌接种缓解阿特拉津对大豆药害作用的方法，具体按以下步骤进行：

一、将根瘤菌菌株转接到YMA平面培养基上活化，然后挑取单菌落接种在YMA液体培养基中培养，获得根瘤菌菌液；

二、将大豆种子种植在阿特拉律污染的土壤中，当大豆幼苗长出第一对真叶后，向大豆幼苗的根部周围注入步骤一所述的根瘤菌菌液，继续培养，完成该方法。

进一步的，步骤一所述根瘤菌为菌种Bradyrhizobium japonicum AC20，购自上海保藏生物技术中心，保藏编号为SHBCC D11101。

本发明的有益效果是：

采用本发明方法施加根瘤菌后，明显缓解了阿特拉津对大豆生长产生的胁迫作用。污染土壤中的阿特拉津对大豆生长及结瘤情况产生显著的抑制作用，菌株AC20(1.2×10⁷CFU/mL～1.2×10⁹CFU/mL)添加后，阿特拉津的抑制作用明显缓解，且当添加量为1.2×10⁸～1.2×10⁹CFU/mL时，缓解效果最明显。此外，阿特拉津还能显著抑制大豆的结瘤数，具体表现在根瘤数量减少，干重下调等方面，大豆的豆血红蛋白含量从9.1mg/g降低到3.4mg/g；本发明添加根瘤菌AC20能有效缓解阿特拉津对上述指标的抑制作用，经验证豆血红蛋白含量增加了111.4％，同时根瘤菌接种可以有效增加阿特拉津胁迫下大豆植株光合色素含量以及氮素积累量，相应含量分别比未添加菌株的处理组增加87.23％和61.85％，缓解了由阿特拉津胁迫导致的大豆光损伤和养分缺失。

本发明用于缓解阿特拉津对大豆药害作用。

附图说明

图1为实施例大豆植株生长情况对比照片，1代表未污染土壤、未注入根瘤菌菌液，2代表污染土壤阿特拉津浓度为20mg·kg^-1、未注入根瘤菌菌液，3代表污染土壤阿特拉津浓度为20mg·kg^-1、注入根瘤菌菌液中有效活菌数为1.2×10⁹CFU/mL；