[发明专利]一种用于蓝莓组织培养的培养基及培养方法

说明书

本发明提供了一种用于蓝莓组织培养的愈伤诱导培养基，其以WPM培养基为基础培养基，含有0.5‑5mg/L CPPU和0.1‑0.4mg/L 2‑ip。本发明还提供了一种蓝莓愈伤组织培养方法，步骤为：将蓝莓外植体接种到前述愈伤诱导培养基中进行诱导培养，形成蓝莓愈伤组织。本发明还公开了将前述蓝莓愈伤组织培养成蓝莓组织培养植株的培养基组合和培养方法。前述培养基和培养方法分化效果好、效率高，能够进行持续分化，并且对多个品种的效果均较好。

技术领域

本发明属于植物组织培养领域，涉及一种用于蓝莓组织培养的培养基及培养方法，特别涉及一种用于蓝莓叶片愈伤组织诱导及生芽以及获得蓝莓组织培养植株的培养基及培养方法。

背景技术

蓝莓(Vaccinium Spp)为杜鹃花科越橘属多年生低灌木。原生于北美州与东亚，分布于朝鲜、蒙古、欧洲、北美洲以及中国黑龙江、内蒙古、吉林长白山等地区。蓝莓果实中营养丰富，富含花青素，具有防止脑神经老化、强心、抗癌、软化血管、增强人体免疫等功能。因为其具有较高的保健价值而风靡世界，是世界粮食及农业组织推荐的五大健康水果之一。

申请号为200710157193.1的中国专利申请公开了一种适宜蓝莓试管苗增殖的培养基组合物及其方法，但该方法愈伤诱导率低，不能充分满足蓝莓组织培养的需求。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明第一方面提供了一种用于蓝莓组织培养的愈伤诱导培养基，所述愈伤诱导培养基以WPM培养基为基础培养基，所述愈伤诱导培养基包括：0.5-5.0mg/L(比如，0.6mg/L、0.8mg/L、1.0mg/L、1.2mg/L、1.4mg/L、1.6mg/L、1.8mg/L、2.0mg/L、2.2mg/L、2.4mg/L、2.6mg/L、2.8mg/L、3.0mg/L、3.2mg/L、3.4mg/L、3.6mg/L、3.8mg/L、4.0mg/L、4.2mg/L、4.4mg/L、4.6mg/L、4.8mg/L)CPPU和0.1-0.4mg/L(比如，0.12mg/L、0.14mg/L、0.16mg/L、0.18mg/L、0.20mg/L、0.22mg/L、0.24mg/L、0.26mg/L、0.28mg/L、0.30mg/L、0.32mg/L、0.34mg/L、0.36mg/L、0.38mg/L)2-ip。

在一些实施方式中，所述蓝莓的品种选自JE、公爵、蓝丰、甜心。

在一些实施方式中，所述愈伤诱导培养基包括：2.0-4.0mg/L CPPU和0.2-0.3mg/L2-ip。

在一些实施方式中，所述愈伤诱导培养基包括：2.0mg/L CPPU和0.2mg/L2-ip。

在一些实施方式中，所述WPM培养基包括：4-8g/L琼脂、20-30g/L蔗糖。

在一些实施方式中，所述WPM培养基还包括：400mg/L硝酸铵、370mg/L七水硫酸镁、278mg/L四水硝酸钙、200mg/L硝酸钾、170mg/L磷酸二氢钾、8.6mg/L七水硫酸锌、22.4mg/L一水硫酸锰、0.25mg/L二水钼酸钠、0.25mg/L五水硫酸铜、73.4mg/L乙二胺四乙酸钠铁、100mg/L肌醇、2mg/L甘氨酸、0.5mg/L盐酸硫胺素、0.5mg/L烟酸和0.1mg/L盐酸吡哆醇。

在一些实施方式中，所述愈伤诱导培养基的pH为5.0-5.5。

本发明第二方面提供了一种用于蓝莓组织培养的培养基组合，所述培养基组合包括本发明第一方面所述的愈伤诱导培养基、生芽培养基和生根培养基。