[发明专利]一种用于蓝莓组织培养的培养基及培养方法有效
申请号: | 202110414403.0 | 申请日: | 2021-04-16 |
公开(公告)号: | CN112931223B | 公开(公告)日: | 2022-05-31 |
发明(设计)人: | 周扬颜;孙卫健;陈文秀;莫翱玮;郭鹏;许鹏昊 | 申请(专利权)人: | 山东大丰园农业有限公司 |
主分类号: | C12N5/00 | 分类号: | C12N5/00;A01H4/00;A01G17/00;A01G24/15;A01G24/10;A01G24/22 |
代理公司: | 北京五洲洋和知识产权代理事务所(普通合伙) 11387 | 代理人: | 荣红颖;张洪生 |
地址: | 262305 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 蓝莓 组织培养 培养基 培养 方法 | ||
1.一种用于蓝莓组织培养的培养基组合,所述培养基组合包括愈伤诱导培养基、生芽培养基和生根培养基;
所述愈伤诱导培养基由WPM培养基、4-8g/L琼脂、20-30g/L蔗糖、2.0-4.0mg/L CPPU和0.1-0.4mg/L 2-ip组成,所述愈伤诱导培养基的pH为5.0-5.5;
所述生芽培养基由WPM培养基、4-8g/L琼脂、20-30g/L蔗糖、1.0mg/L CPPU和0.4-0.6mg/L 2-ip组成,所述生芽培养基的pH为5.0-5.5;
所述生根培养基由1/2MS培养基、5-9g/L琼脂、15-25g/L蔗糖和2.0-3.0mg/L NAA组成,所述生根培养基的pH为5.0-5.5;
所述WPM培养基由400mg/L硝酸铵、370mg/L七水硫酸镁、278mg/L四水硝酸钙、200mg/L硝酸钾、170mg/L磷酸二氢钾、8.6mg/L七水硫酸锌、22.4mg/L一水硫酸锰、0.25mg/L二水钼酸钠、0.25mg/L五水硫酸铜、73.4mg/L乙二胺四乙酸钠铁、100mg/L肌醇、2mg/L甘氨酸、0.5mg/L盐酸硫胺素、0.5mg/L烟酸和0.1mg/L盐酸吡哆醇组成;
所述1/2MS培养基由950mg/L硝酸钾、166.1mg/L氯化钙、825mg/L硝酸铵、90.35mg/L硫酸镁、85mg/L磷酸二氢钾、0.025mg/L硫酸铜、6.2mg/L硼酸、16.9mg/L硫酸锰、0.25mg/L钼酸钠、8.6mg/L硫酸锌、0.025mg/L氯化钴、0.83mg/L碘化钾、27.8mg/LFeSO4·7H2O、37.26mg/LNa2-EDTA·2H2O、2.0mg/L甘氨酸、100mg/L肌醇、0.50mg/L烟酸、0.1mg/L盐酸硫胺素和0.5mg/L盐酸吡哆醇组成。
2.如权利要求1所述的培养基组合,其特征在于,所述蓝莓的品种选自JE、公爵、蓝丰、甜心。
3.如权利要求1所述的培养基组合,其特征在于,在所述愈伤诱导培养基中,CPPU的浓度为2.0mg/L,2-ip的浓度为0.2mg/L。
4.如权利要求1所述的培养基组合,其特征在于,在所述生芽培养基中,CPPU的浓度为1.0mg/L,2-ip的浓度为0.4mg/L。
5.如权利要求1所述的培养基组合,其特征在于,在所述生根培养基中,NAA的浓度为2.0mg/L。
6.如权利要求1所述的培养基组合,其特征在于,所述培养基组合还包括继代培养基;
所述继代培养基由WPM培养基、4-8g/L琼脂、20-30g/L蔗糖、0.5-3.0mg/L CPPU组成,所述继代培养基的pH为5.0-5.5。
7.如权利要求6所述的培养基组合,其特征在于,在所述继代培养基中,CPPU的浓度为3.0mg/L。
8.一种蓝莓组织扩繁方法,所述组织扩繁方法为:将蓝莓外植体接种到权利要求1-5中任一项所述的培养基组合中的所述愈伤诱导培养基中进行诱导培养,形成蓝莓愈伤组织;
将所述蓝莓愈伤组织的愈伤团接种到权利要求1-5中任一项所述的培养基组合中的所述生芽培养基中进行生芽培养,形成长有不定芽的蓝莓植株;
将所述长有不定芽的蓝莓植株接种到权利要求1-5中任一项所述的培养基组合中的所述生根培养基中进行生根培养,形成长有不定芽和根的蓝莓植株。
9.如权利要求8所述的组织扩繁方法,其特征在于,所述诱导培养为暗培养。
10.如权利要求8所述的组织扩繁方法,其特征在于,所述诱导培养中,温度为22-26℃。
11.如权利要求8所述的组织扩繁方法,其特征在于,所述诱导培养中,时间为12-22天。
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