[发明专利]一种制备全脑组织石蜡切片的方法与应用有效
| 申请号: | 202110405737.1 | 申请日: | 2021-04-15 |
| 公开(公告)号: | CN113203618B | 公开(公告)日: | 2022-04-26 |
| 发明(设计)人: | 方美英;汤启国;李贞;雒亚彪;薛明明;产舒恒;何帅涵;张浩;吴常信 | 申请(专利权)人: | 中国农业大学 |
| 主分类号: | G01N1/30 | 分类号: | G01N1/30;G01N1/36;G01N33/53;G01N33/58;G01N21/64 |
| 代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 孙怡 |
| 地址: | 100193 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 制备 组织 石蜡 切片 方法 应用 | ||
1.一种制备全脑组织石蜡切片的方法,其特征在于,在固定步骤所采用的固定液为含3.8-4.2%的甲醛和0.9-1.1%的戊二醛的固定液;所述全脑组织来自于鸡不同胚胎时期;
在脱水步骤,用于脱水的乙醇浓度梯度依次为20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、100%、100%;
所述脱水步骤具体为:以20%的乙醇处理55-65分钟,以30%的乙醇处理55-65分钟,以40%的乙醇处理55-65分钟,以50%的乙醇处理55-65分钟,以60%的乙醇处理55-65分钟,以70%的乙醇处理9-10小时,以80%的乙醇处理55-65分钟,以90%的乙醇处理55-65分钟,以95%的乙醇处理55-65分钟,以无水乙醇处理28-32分钟,再以更换后的无水乙醇再次处理28-32分钟。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述固定液为含4%的甲醛和1%的戊二醛的固定液。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述脱水步骤具体为:以20%的乙醇处理1小时,以30%的乙醇处理1小时,以40%的乙醇处理1小时,以50%的乙醇处理1小时,以60%的乙醇处理1小时,以70%的乙醇处理10小时,以80%的乙醇处理1小时,以90%的乙醇处理1小时,以95%的乙醇处理1小时,以无水乙醇处理0.5小时,再以更换后的无水乙醇再次处理0.5小时。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,在固定时,先将全脑组织在固定液中固定2.8-3.2小时,之后再从全脑组织正中线切开,继续固定至23.5-24.5小时。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,在固定时,先将全脑组织在固定液中固定3小时,之后再从全脑组织正中线切开,继续固定至24小时。
6.权利要求1-5任一项所述的方法在全脑组织HE染色和免疫荧光实验中的应用。
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