[发明专利]抗新型冠状病毒受体结合区域中和抗体及其应用

说明书

本发明提供了抗新型冠状病毒受体结合区域中和抗体及其应用，属于生物制品技术领域，所述中和抗体包括重链可变区和轻链可变区；所述重链可变区包括SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:13所示的重链CDR3，所述轻链可变区包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:16所示的轻链CDR3。本发明利用LIBRA‑seq高通量筛选得到SARS‑CoV‑2受体结合区域中和抗体C14646P3S与C2767P3S，在体外对SARS‑CoV‑2假病毒和活病毒具有较强的中和能力，能良好地阻断新型冠状病毒受体结合区域与其受体的结合，在预防、治疗和诊断SARS‑CoV‑2感染方面具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于生物制品技术领域，涉及抗新型冠状病毒受体结合区域中和抗体及其应用。

背景技术

新型冠状病毒SARS-CoV-2是一种包膜单正链RNA病毒，属于冠状病毒β-CoV家族，基因组主要编码4种结构蛋白、约16种非结构蛋白(nap1-16)以及5～8种辅助蛋白，其中4种结构蛋白分别为刺突蛋白(S蛋白)、包膜蛋白(E蛋白)、膜蛋白(M蛋白)和核衣壳蛋白(N蛋白)。在4种结构蛋白中，S蛋白在SARS-CoV-2对宿主细胞的吸附、膜融合、侵入和传播过程中具有至关重要的作用。S蛋白包括参与病毒-受体结合的S1亚基和参与病毒膜融合的S2亚基，而S1亚基又进一步分为N末端区域(NTD)和受体结合区域(RBD)。SARS-CoV-2通过S蛋白识别结合ACE2受体及TMPRSS2辅助受体感染宿主细胞并开始复制周期。

有实验表明，SARS-CoV-2的受体结合区域中和抗体能特异性结合S抗原的受体结合区域，进而阻断病毒侵袭宿主细胞提供一定的保护作用，这为SARS-CoV-2中和抗体的研发提供了方向，寻找以SARS-CoV-2S蛋白受体结合区域表位为靶点的抗体迫在眉睫。

抗体和疫苗是预防和治疗新冠肺炎(Coronavirus disease 2019，COVID-19)的最佳方式，筛选具备良好中和活性的单克隆抗体对于预防和治疗COVID-19至关重要。X.Sunney Xie、Chen Wei、Linqi Zhang等人通过抗原富集B细胞后，利用单细胞测序及单细胞PCR技术得到了一些高效中和抗体，但是尚未应用于临床，目前也还未有治疗性抗体通过临床审批应用到疾病治疗实践的报道，因此仍需进行保护性中和抗体的研发，不仅可以为治疗性抗体的应用提供候选目标，而且可以为疫苗设计提供思路。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供了抗新型冠状病毒受体结合区域中和抗体及其应用，所述中和抗体不仅对SARS-CoV-2假病毒具有较强的中和能力，在体外实验中对活病毒也表现出较强的中和能力，中和抗体C2767P3S和C14646P3S、C14646P3S的变体C14646P3S_M1、C14646P3S_M2、C14646P3S_M3有望成为抗SARS-CoV-2感染的候选治疗性抗体。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了抗新型冠状病毒受体结合区域中和抗体，所述中和抗体包括重链可变区和轻链可变区；

所述重链可变区包括SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:13所示的重链CDR3。

本发明中，中和抗体的重链CDR3是决定抗体对抗原中和作用最主要的结构域，含有SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:13所示的重链CDR3的抗体对新型冠状病毒受体结合区域具有较强的结合能力，对SARS-CoV-2假病毒和活病毒均具有较强的中和效果。

优选地，所述轻链可变区包括SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:16所示的轻链CDR3。

优选地，所述重链可变区还包括SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:11所示的重链CDR1。

优选地，所述重链可变区还包括SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:12所示的重链CDR2。