[发明专利]一种蛋白质长期保存的方法

说明书

本发明公开了一种蛋白质长期保存的方法，通过将蛋白类药物溶解后，加入两亲性聚合物混悬液，充分混匀，纯化，得到受聚合物保护的蛋白类药物溶液。该方法既不破坏蛋白类药物原本的蛋白质结构，也不会阻碍蛋白类药物的药效，很好地解决了蛋白类普遍存在常温下贮存期短易变性变质的问题。该方法还是一种普适性的提高蛋白类药物的热稳定性的方法，显著改善了蛋白类药物的热稳定性，将扩展其在生物医药方面的应用，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，更具体地，涉及一种提高蛋白类药物热稳定性的方法。

背景技术

在生物医药方面，蛋白类药物(疫苗、激素、细胞因子等)普遍存在常温下贮存期短的问题，通常在贮存运输过程中需要冷链保护，这导致了其较高的市场价格，改善这些药物的热稳定性，将扩展其在发展中国家的应用；在酶工程中，蛋白质作为生物催化剂，经常需要耐受高温的反应条件，若能提高其在高温中的稳定性，将大大提高反应效率，使酶催化这种绿色、经济、可持续的工业生产方式得到更为广泛的应用；在食品工业中，食品蛋白质在加工、贮藏过程中不可避免的要遭受热的影响，例如高温灭菌过程，在这些过程中尽量减少蛋白质的劣化，保留其营养价值具有重要意义。大多数蛋白质的这种热不稳定性的缺点是阻碍其在生物医药、酶工程、食品工业等应用的重要因素之一，因此，对蛋白质热不稳定性的改进一直以来是一个重点和难点。因此，急需一种具有普适性的蛋白质，特别是蛋白药物长期保存的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有普适性的蛋白质长期保存的方法。

本发明所采取的技术方案是：

本发明的第一个方面，提供两亲性聚合物在制备可长期保存的蛋白制剂中的应用，所述两亲性聚合物由疏水性高分子材料与水性高分子材料聚合而成。

优选地，所述疏水性高分子材料为聚马来酸酐、聚(马来酸酐-十八碳烯)、聚(马来酸酐-十二碳烯)、聚(马来酸酐-十四碳烯)或聚(马来酸酐-十六碳烯)中的至少一种；

所述亲水性高分子材料优选为聚乙二醇、聚氧乙烯、mPEG-NH₂-400、mPEG-NH₂-600、mPEG-NH₂-800、mPEG-NH₂-1000、mPEG-NH₂-2000、mPEG-NH₂-4000或mPEG-NH₂-5000中的至少一种。

更优选地，所述疏水性高分子材料为聚马来酸酐、聚(马来酸酐-十八碳烯)；

所述亲水性高分子材料为聚乙二醇。

进一步地，根据本发明第一个方面所述的方法，所述两亲性聚合物的亲水性高分子材料与疏水性高分子材料的嫁接摩尔比为(1:10)～(2:1)；更优选为(1:10)～(1:1)。

进一步地，根据本发明第一个方面所述的方法，所述两亲性聚合物的制备方法为将疏水性高分子材料溶解于有机溶剂中，加入亲水性高分子材料混合反应，除去反应体系中的有机溶剂和其他杂质，制得两亲性聚合物混悬液。

优选地，其中，所述二甲基亚砜和纯水的体积比为1:(8～12)。

更优选地，所述二甲基亚砜和纯水的体积比为1:10。

本发明的第二个方面，提供一种蛋白制剂，由蛋白质与本发明第一个方面所述的两亲性聚合物混合而成。

本发明的第三个方面，提供一种蛋白质长期保存的方法，将蛋白质溶解后，逐滴滴加本发明第一个方面所述的两亲性聚合物的混悬液；搅拌均匀后纯化。

进一步地，根据本发明第三个方面所述的方法，所述搅拌为在磁力搅拌器上充分混匀。

优选地，磁力搅拌器的转速为350～450rpm，搅拌时间为1.5～2.5h。