[发明专利]一株木贼镰刀菌L1293及其应用有效
申请号: | 202110395810.1 | 申请日: | 2021-04-13 |
公开(公告)号: | CN113265336B | 公开(公告)日: | 2022-04-29 |
发明(设计)人: | 刘宏伟;韩俊杰 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12P17/08;C12R1/77 |
代理公司: | 北京律和信知识产权代理事务所(普通合伙) 11446 | 代理人: | 项荣;何春晖 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 木贼 镰刀 l1293 及其 应用 | ||
1.一株木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)L1293,其保藏编号为CGMCC NO.19032。
2.根据权利要求1中所述的木贼镰刀菌(Fusarium equiseti)L1293在制备玉米赤霉烯酮中的应用。
3.根据权利要求2中所述的应用,其特征在于,所述玉米赤霉烯酮的结构式为:
4.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述制备玉米赤霉烯酮的方法包括如下步骤:
制备菌株L1293的种子液;
制备菌株L1293固体发酵培养物;
制备体积比为10:1的氯仿-甲醇梯度洗脱液;
纯化并重结晶得高纯度玉米赤霉烯酮。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述制备菌株L1293的种子液的方法包括:
将菌株L1293在PDA平皿中25℃培养3天,然后挑取菌丝块接种于装有100ml种子培养基的300ml三角瓶中,25℃震荡培养3天作为种子液。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述制备菌株L1293固体发酵培养物方法包括:
将种子液5ml接入装有小麦培养基的500ml三角瓶中,25℃黑暗中培养3周,得到菌株L1293固体发酵培养物。
7.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述制备体积比为10:1的氯仿-甲醇梯度洗脱液的方法包括:
将发酵培养物55-58℃烘干,粉碎,用2L乙酸乙酯超声提取3次,合并提取液减压浓缩得到提取物;采用正相硅胶层析分离方法,用依次以100:1、20:1、10:1、5:1和1:1的氯仿-甲醇溶剂进行梯度洗脱,其中10:1比例洗脱流份进行收集。
8.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述纯化并重结晶得高纯度玉米赤霉烯酮的方法包括:
合并10:1的氯仿-甲醇梯度洗脱液并浓缩后采用LH-20凝胶色谱进一步纯化,再经乙腈重结晶,得到高纯度玉米赤霉烯酮。
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