[发明专利]环状RNA作为骨关节炎标志物的应用

说明书

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及环状RNA作为骨关节炎标志物的应用。所述环状RNA为has_circ_0000423，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明研究发现与正常软骨组织相比，hsa_circ_0000423在骨关节炎患者软骨组织中呈现高表达，因此，通过检测hsa_circ_0000423的含量，有助于判断受试者是否存在患骨关节炎的高风险，这为临床辅助诊断及评估骨关节炎，意义显著。同时，本发明通过进一步研究软骨细胞生物学功能发现了hsa_circ_0000423在OA发生发展的诊断及治疗价值，从而为该病的诊治提供关键的理论依据及干预靶点，具有重要的潜在价值和良好的应用前景。

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，具体涉及环状RNA has_circ_0000423作为骨关节炎标志物的应用。

背景技术

骨关节炎(osteoarthritis，OA)是在机械性和生物性因素作用下，关节软骨细胞、细胞外基质和软骨下骨的正常合成与降解失衡，导致关节软骨退变、纤维化、软骨下骨硬化、炎性变和骨赘形成，出现关节疼痛、活动受限、畸形等为临床表现的一种疾病。骨关节炎是骨科临床困扰已久且又亟待解决的难题，多发于老年人，常累及全身骨关节中的脊柱、髋关节和膝关节等负重较大的关节，导致受累关节僵硬、变形，从而使关节功能受到严重影响，影响患者的生活质量。因此，研究如何抑制关节软骨退变，预防OA发生与发展一直是骨科临床寻求的热点。目前主要预防及修复的措施有：间质干细胞的移植后的促软骨分化、自体软骨或生物材料移植等填补缺损软骨部位，虽取得了一定疗效，但仍存在再生软骨组织和缺损边缘软骨退变等问题。因此，寻找一种灵敏性高，特异性强的生物标志物和一种安全有效的靶点作用方法，对骨关节炎早发现、早诊断及早干预治疗至关重要。

circRNAs最早于1976年首次在类病毒中发现，并在随后的数十年中，在真核细胞和病毒中也同样检测到circRNAs的存在。起初，因为其表达水平低，人们对其很少关注，并且认为它的产生是选择性剪切失败的产物。然而，随着新一代测序技术的出现和生物信息学技术的不断发展，circRNAs在真核细胞中具有调节功能已经成为了共识。Jeck等人和Memcz等人通过RNA测序和生物信息分析，同样发现在不同物种、细胞中circRNAs存在表达。circRNA是闭合的环状结构，没有5’-3’极性和聚核苷酸的尾巴结构，其由特殊的末端反向互补的前体mRNA可变剪切，并首尾环化形成环状RNA。近几年的研究发现circRNA可能存在以下几种功能：①作为内源mRNA竞争者，拥有miRNA海绵结合位点，能吸附miRNA，抑制其功能；②调控可变剪切或转录过程；调控亲本基因的表达；③可直接翻译多肽。circRNA可调控多个miRNA，因而被称为miRNA“sponge”功能，而miRNA可调控多达上百个蛋白编码基因，这些蛋白分子与非编码信号构成了复杂而精确的RNA-RNA互作网络，从而可在OA中发挥着重要的调控作用，这些功能的发现为探索OA疾病的诊断治疗转归等方面提供了新的思路，并可将circRNAs可能作为临床诊断生物标记物和治疗靶点提供新思路。目前，与骨关节炎相关的环状RNA仍有很多未被发现，研究寻找这些环状RNA对骨关节炎的预防诊断和治疗都具有重要的研究价值和临床价值。

发明内容

本发明旨在解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提供了环状RNA，has_circ_0000423，作为骨关节炎标志物的应用。

本发明所采用的技术方案如下文所述。

本发明一方面提供一种检测环状RNA has_circ_0000423的试剂在制备用于骨关节炎的诊断和/或预后的诊断剂中的应用，其中，所述环状RNA has_circ_0000423的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

根据本发明的一些实施方式，所述试剂包括适用于如下至少一种方法的试剂：荧光染料法、数字PCR、共振光散射法、实时荧光定量PCR、测序或生物质谱法。