[发明专利]一种荧光探针及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种荧光探针，包括：配体部分A，任选的连接体部分C和荧光染料部分，所述荧光染料部分为粘度响应性荧光染料基团，包括电子供体部分D、共轭体系B和电子受体部分，所述配体部分A为能够与蛋白标签或融合蛋白标签的靶蛋白特异性识别并标记的基团，可选地，所述配体部分A为能够与蛋白标签或融合蛋白标签的靶蛋白特异性识别并共价标记的基团；其特征在于，所述配体部分A直接共价连接于荧光染料部分的电子供体部分D，或者，通过连接体部分C共价连接于荧光染料部分的电子供体部分D。

2.根据权利要求1所述的荧光探针，其具有如式(I)所示的结构，

其中，连接体部分C为任选存在的基团，选自亚烷基、改性亚烷基；

式(I)中的式(I-R)所示结构部分为荧光染料部分，

其中：

电子供体部分-D-为-NX₁-X₂-，X₁选自氢、烷基或改性烷基，X₂选自亚烷基或改性亚烷基，X₁，X₂任选相互连接，与N原子一起形成脂杂环；

共轭体系B为选自芳香环、芳香杂环中的至少一种共轭连接而形成，其为如下式(I-1)所示的结构，其中所含的各氢原子任选独立地被选自卤原子、硝基、亲水性基团、烷基和改性烷基的取代基取代，所述取代基任选地相互连接构成脂环或脂杂环；

任选地，所述式(I-1)结构与X₁、X₂相互连接形成脂杂环；

电子受体部分具有如下式(I-2)所示的结构，

其中，

R₁选自氢、卤原子、硝基、烷基、芳基、杂芳基、亲水性基团或改性烷基；

R₂选自氰基、羧基、酮基、酯基、酰胺基、膦酸基、膦酸酯基、磺酸基、磺酸酯基、砜基、亚砜基、芳基、杂芳基、烷基或改性烷基；

R₃为氰基；

电子受体部分任选形成下式(I-2-a)、(I-2-b)环状结构：

其中，R_a、R_b独立地选自氢、亲水性基团、烷基和改性烷基，R_a和R_b任选地相互连接形成脂环或脂杂环；

Y₁选自-O-、-S-、-(S＝O)-和-(NR_i)-，其中R_i选自氢、烷基或改性烷基；

Y₂选自＝O、＝S、＝S＝O和＝NR_i，其中R_i选自氢、烷基或改性烷基；

Y₃选自＝O、＝S、＝S＝O和＝NR_i，其中R_i选自氢、烷基或改性烷基；

或者，Y₃为＝C(R_e)(CN)；

R_e选自氰基、羧基、酮基、酯基、酰胺基、膦酸基、膦酸酯基、磺酸基、磺酸酯基、砜基、亚砜基、芳基、杂芳基、烷基或改性烷基；

当R₂或R_e为芳基或杂芳基时，环上的氢原子任选独立地被选自卤原子、硝基、亲水性基团、烷基或改性烷基中的取代基取代；任选地，所述取代基相互连接构成饱和或不饱和的脂环或脂杂环；

其中，

所述烷基为具有1～30个碳原子的饱和脂肪族直链或支链的烷基；

所述亚烷基为具有1～30个碳原子的饱和脂肪族直链或支链的亚烷基；

所述改性烷基为烷基的任意碳原子被选自卤原子、-O-、-OH、-CO-、-NO₂、-CN、-S-、-SO₂-、-(S＝O)-、苯基、亚苯基、伯氨基、仲氨基、叔氨基、季铵盐基、饱和或不饱和的单环或双环亚环烃基、桥联脂杂环中的至少一种基团置换所得的基团，所述改性烷基具有1～300个碳原子，其碳碳单键任选独立地被碳碳双键或碳碳叁键置换；

所述改性亚烷基为亚烷基的任意碳原子被选自卤原子、-O-、-OH、-CO-、-NO₂、-CN、-S-、-SO₂-、-(S＝O)-、苯基、亚苯基、伯氨基、仲氨基、叔氨基、季铵盐基、饱和或不饱和的单环或双环亚环烃基、桥联脂杂环中的至少一种基团置换所得的基团，所述改性亚烷基具有1～30个碳原子，其碳碳单键任选独立地被碳碳双键或碳碳叁键置换；

所述脂环为饱和或不饱和的4～10元单环或多环脂环；

所述脂杂环为环上含有选自N、O、S或Si中的至少一种杂原子的饱和或不饱和的4～10元单环或多环脂杂环，所述脂杂环上含有S原子时，其任选为-SO-或-SO₂-；所述脂杂环任选被卤原子、硝基、烷基、芳基、亲水性基团和改性烷基取代；

所述芳基或芳香环为5～10元单环或稠合双环；

所述杂芳基或芳香杂环为环上含有选自N、O、S或Si中的至少一种杂原子的5～10元单环或稠合双环；

所述卤原子各自独立地选自F、Cl、Br、I；

所述亲水性基团为羟基、磺酸基、硫酸基、磷酸基、伯氨基、仲氨基或叔氨基及其取代物；

所述单环亚环烃基为4～7元亚环烃基；

所述双环亚环烃基为5～7元双环亚环烃基；

所述桥联脂杂环为环上含有选自N、O、或S中的至少一种杂原子的5～20元桥联脂杂环。