[发明专利]一种含有p53核酸适配体的多核苷酸及其应用

说明书

一种含有p53核酸适配体的多核苷酸及其应用，所述多核苷酸包括核酶、接头、可特异性结合至p53蛋白的核酸适配体，所述接头连接在所述核酶、核酸适配体之间。本发明首次提出并成功将p53适体与可编码核酶的核苷酸连接，实验证实，该多核苷酸上的p53适体可结合至p53蛋白，介导核酶序列的自体剪切，调控目的基因mRNA的翻译。与传统的基因转录调控因子比较，适体核酶核糖开关结构简单、调控方式简洁、响应迅速；更重要的是，免疫原性低，因此具有良好的临床应用前景。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体涉及一种含有p53核酸适配体的多核苷酸及其应用。

背景技术

p53蛋白编码基因是人类肿瘤中最常发生突变的抑癌基因，超过50％的恶性肿瘤中出现该基因的突变。这些突变不仅抑制了p53蛋白的抗癌活性，而且促进肿瘤细胞的生长或转移。基于p53基因及其突变位点，寻找恶性肿瘤的治疗策略，一直是肿瘤研究领域的热点之一。尽管现有技术开发出了大量的小分子化合物或多肽，但其调控效果欠佳。

发明内容

根据第一方面，在一实施例中，提供一种含有p53核酸适配体(简称p53适体)的多核苷酸，所述多核苷酸包括核酶、接头、可特异性结合至p53蛋白的核酸适配体，所述接头连接在所述核酶、核酸适配体之间。

根据第二方面，在一实施例中，提供一种含有荧光蛋白基因编码序列的多核苷酸，所述多核苷酸含有第一方面所述多核苷酸以及可编码第一荧光蛋白的核苷酸，所述核酶、接头、可特异性结合至p53蛋白的核酸适配体连接而成的核苷酸即为p53适体核酶。

根据第三方面，在一实施例中，提供一种含有可编码重组酶的基因的多核苷酸，包括第一方面所述多核苷酸以及与第一方面所述多核苷酸连接的且可编码重组酶的核苷酸，所述核酶、接头、可特异性结合至p53蛋白的核酸适配体连接而成的核苷酸即为p53适体核酶。

根据第四方面，在一实施例中，提供一种多核苷酸组合，包括第三方面所述多核苷酸，即第一多核苷酸。

根据第五方面，在一实施例中，提供一种构建体，所述构建体含有第一方面所述多核苷酸，和/或第二方面所述多核苷酸，和/或第三方面所述多核苷酸，和/或第四方面所述多核苷酸组合。

根据第六方面，在一实施例中，提供一种表达系统，所述表达系统含有第五方面所述构建体，和/或，所述表达系统的基因组中整合有外源的第一方面所述多核苷酸，和/或第二方面所述多核苷酸，和/或第三方面所述多核苷酸，和/或第四方面所述多核苷酸组合。

根据第七方面，在一实施例中，提供一种药物组合物，其包括与可药用赋形剂组合的第一方面所述多核苷酸，和/或第二方面所述多核苷酸，和/或第三方面所述多核苷酸，和/或第四方面所述多核苷酸组合，和/或第五方面所述构建体，和/或第六方面所述表达系统。

根据第八方面，在一实施例中，提供第一方面所述多核苷酸，和/或第二方面所述多核苷酸，和/或第三方面所述多核苷酸，和/或第四方面所述多核苷酸组合，和/或第五方面所述构建体，和/或第六方面所述表达系统在细胞培养系统中的应用，用于获得所需基因产物。

依据上述实施例的含有p53核酸适配体的多核苷酸及其应用，本发明首次提出并成功将p53适体与可编码核酶的核苷酸连接，实验证实，该多核苷酸上的p53适体序列可结合至p53蛋白，介导核酶序列的自体剪切，调控目的基因mRNA的翻译。与传统的基因转录调控因子比较，适体核酶核糖开关结构简单、调控方式简洁、响应迅速；更重要的是，免疫原性低，因此具有良好的临床应用前景。

附图说明

图1显示为p53适体核酶构建的示意图；

图2显示为检测p53适体核酶特异性及有效性的双荧光素酶实验示意图；

图3显示为p53 aptazyme-Cre肿瘤基因杀伤线路的构建示意图；