[发明专利]一种制作黑曲霉菌剂的方法在审
申请号: | 202110361874.X | 申请日: | 2021-04-02 |
公开(公告)号: | CN113061537A | 公开(公告)日: | 2021-07-02 |
发明(设计)人: | 施军营;王延凯;何清玉 | 申请(专利权)人: | 深高蓝德环保科技集团股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;C12R1/645 |
代理公司: | 北京市盛峰律师事务所 11337 | 代理人: | 于国富 |
地址: | 450000 河南省郑州市经济技术开发区经开第*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 制作 曲霉 方法 | ||
1.一种制作黑曲霉菌剂的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1)在预设活化温度下用PDA固体培养基活化黑曲霉,所述预设活化温度为25℃~35℃;
S2)将活化好的黑曲霉接种至试管斜面中,在预设接种温度预设接种时长下培养出斜面孢子;所述预设接种温度为25℃~35℃;所述预设接种时长为6~7天;
S3)用无菌水清洗所述斜面孢子,获得孢子液,将所述孢子液接种至液体培养基中制备黑曲霉种子液,并将所述液体培养基放入预设转速下的震荡培养箱中进行培养,培养温度为25℃~35℃,培养时间为3~4天,获取制备完成的黑曲霉种子液;
S4)获取餐厨垃圾螺压渣和机械脱水的污泥,并将所述餐厨垃圾螺压渣和机械脱水的污泥打碎后均匀混合,获得均匀混合物;
S5)向所述均匀混合物加入无机盐溶液,每公斤所述均匀混合物加入100毫升无机盐溶液,获得混合液;
S6)用麸皮调节所述混合液的含水率至50%~60%,对所述混合液进行搅拌,并搅拌均匀后在预设灭菌温度预设灭菌时长下进行灭菌,获得灭菌后的物料,将所述灭菌后的物料作为固体培养基;
S7)将制备完成的黑曲霉种子液接种至所述固体培养基,并将接种后的固体培养基放入发酵箱中培养,培养完成后进行常温干燥,获得黑曲霉菌剂。
2.根据权利要求1所述的制作黑曲霉菌剂的方法,其特征在于,在步骤S3)中,所述液体培养基包括麸皮20g、蔗糖5g、尿素3g、蛋白胨1g、磷酸氢二钾1g、七水硫酸镁0.5g、七水硫酸亚铁0.01g和水1000mL;所述液体培养基的pH为7.0。
3.根据权利要求1所述的制作黑曲霉菌剂的方法,其特征在于,在步骤S3)中,在步骤S4)中,所述餐厨垃圾螺压渣和所述机械脱水的污泥的质量比为5:(1~3)。
4.根据权利要求1所述的制作黑曲霉菌剂的方法,其特征在于,在步骤S5)中,所述无机盐溶液包括磷酸二氢钾20g、尿素15g、硝酸钾15g、七水硫酸镁15g、七水硫酸亚铁50mg、硫酸锰10mg、七水硫酸锌15mg、氯化钴20mg、水1000mL。
5.根据权利要求1所述的制作黑曲霉菌剂的方法,其特征在于,在步骤S7)中,将制备完成的黑曲霉种子液接种至所述固体培养基,黑曲霉种子液与固体培养基的质量比为(0.5~3):10。
6.根据权利要求1所述的制作黑曲霉菌剂的方法,其特征在于,在步骤S7)中,将制备完成的黑曲霉种子液接种至所述固体培养基,并将接种后的固体培养基放入发酵箱中培养,培养完成后进行常温干燥,获得黑曲霉菌剂,包括以下步骤:
S71)将黑曲霉种子液接种至固体培养基中,在29~31℃下进行培养,获得接种培养后的固体培养基;
S72)将所述接种培养后的固体培养基放入发酵箱中,用超声加湿器调节发酵箱内湿度至90%RH以上,设置发酵时长为t,在前预设时长t1内设置发酵温度为30℃,在后预设时长t-t1内关闭加湿器、并设置发酵温度为25℃;
S73)培养完成后进行常温干燥,获得黑曲霉菌剂,干燥温度为30~45℃,黑曲霉菌剂的干燥含水率小于10%。
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