[发明专利]靶向Her2并表达PD-L1抗体的嵌合抗原受体T细胞及其制备方法和应用在审
申请号: | 202110348543.2 | 申请日: | 2021-03-31 |
公开(公告)号: | CN115141806A | 公开(公告)日: | 2022-10-04 |
发明(设计)人: | 曾滢;汪婷婷;杨忠华 | 申请(专利权)人: | 深圳宾德生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/62;C12N15/867;A61K39/00;A61K39/395;A61P35/00 |
代理公司: | 深圳市慧实专利代理有限公司 44480 | 代理人: | 孙东杰 |
地址: | 518000 广东省深圳市南山区前海深港合作区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 靶向 her2 表达 pd l1 抗体 嵌合 抗原 受体 细胞 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种靶向Her2并表达PD-L1抗体的嵌合抗原受体T细胞,其特征在于,包括靶向Her2的的嵌合抗原受体CAR-Her2和PD-L1抗体。
2.如权利要求1所述的靶向Her2并表达PD-L1抗体的嵌合抗原受体T细胞,其特征在于,所述CAR-Her2包括从氨基端到羧基端顺次连接的靶向Her2的单链抗体、胞外铰链区、跨膜区和胞内信号区的氨基酸序列,所述靶向Her2的单链抗体的氨基酸序列包括如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。
3.如权利要求1所述的靶向Her2并表达PD-L1抗体的嵌合抗原受体T细胞,其特征在于,所述CAR-Her2的氨基酸序列包括如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
4.如权利要求1所述的靶向Her2并表达PD-L1抗体的嵌合抗原受体T细胞,其特征在于,所述PD-L1抗体的氨基酸序列包括如SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
5.一种靶向Her2并表达PD-L1抗体的嵌合抗原受体T细胞的制备方法,其特征在于,包括:
提供靶向Her2的嵌合抗原受体CAR-Her2的编码基因和PD-L1抗体的编码基因,将所述CAR-Her2的编码基因和所述PD-L1抗体的编码基因插入到同一基因传递载体中,得到重组基因传递载体;
将所述重组基因传递载体进行包装并转染宿主细胞,得到重组慢病毒;
将所述重组慢病毒转染CD3阳性T淋巴细胞,获得靶向Her2并表达PD-L1抗体的嵌合抗原受体T细胞。
6.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述CAR-Her2的编码基因包括从5’端到3’端顺次连接的信号肽的编码基因、靶向Her2的单链抗体的编码基因、胞外铰链区的编码基因、跨膜区的编码基因、胞内信号区的编码基因,其中,所述靶向Her2的单链抗体的编码基因包括如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列对应的核苷酸序列。
7.如权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述PD-L1抗体的编码基因包括如SEQID NO:3所示的氨基酸序列对应的核苷酸序列。
8.一种重组载体,其特征在于,包括如权利要求1-4任一项所述的或如权利要求5-7任一项所述的制备方法制得的靶向Her2并表达PD-L1抗体的嵌合抗原受体T细胞中所述CAR-Her2和所述PD-L1抗体的编码基因。
9.一种宿主细胞,其特征在于,包括如权利要求8所述的重组载体。
10.一种如权利要求1-4任一项所述或如权利要求5-7任一项所述的制备方法制得的靶向Her2并表达PD-L1抗体的嵌合抗原受体T细胞、如权利要求8所述的重组载体或如权利要求9所述的宿主细胞在制备预防、诊断和治疗恶性肿瘤的药物中的应用。
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