[发明专利]主动靶向型两亲性多肽复合纳米胶束前药及制备与应用

说明书

本发明公开了一种主动靶向型两亲性多肽复合纳米胶束前药及制备与应用，属于生物医药技术领域。本发明复合纳米胶束前药由带负电荷的第一多肽和带正电荷的第二多肽通过静电相互作用和亲疏水作用共组装得到；第一多肽为Lys‑AA_m‑Gly‑Arg‑Gly‑Asp‑Ser，其中AA为天冬氨酸或谷氨酸，m取值为1、2、3或4；第二多肽为Cys‑BB_n，其中BB为赖氨酸、精氨酸或组氨酸，n取值为1、2、3或4；第一多肽N端的氨基与疏水烷基链连接，第一多肽赖氨酸侧链的氨基与荧光分子连接；第二多肽中的半胱氨酸通过巯基共价连接抗肿瘤药物。该纳米复合胶束能够主动靶向到肿瘤细胞，响应肿瘤微酸环境后解组装，形成尺寸为20‑30nm的小尺寸胶束，有利于多肽抗肿瘤前药的在肿瘤部位的深层递送。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，更具体地，本发明提供了一种基于静电相互作用的主动靶向型两亲性多肽复合纳米胶束前药及制备与应用。

背景技术

基于多肽载体的抗肿瘤药物研发是目前的热点之一。近年来，分子自组装领域的快速发展为智能多肽纳米药物研发提供了新的机遇，该技术将不同功能的分子以非共价键组装成高度有序的纳米体系，是构建结构多样、功能集成的纳米药物的有效策略。生物分子多肽序列中氨基酸残基具有不同的化学结构，其可以利用肽链间氢键作用以及氨基酸残基之间的各种非共价键的作用有效实现分子自组装。基于多肽及其衍生物在结构设计上精确可控的特性，可将具有不同生物功能的多肽分子通过可控组装进行模块化功能集成，构建多肽纳米药物。两亲性多肽由于其良好的生物相容性、生物安全性和生物可降解性，被广泛应用于生物医学领域，如组织工程，伤口修复和基因治疗，特别是作为载体用于治疗药物的输送。

通过静电相互作用将两段功能性两亲性多肽复合成多功能纳米诊疗剂能实现多肽纳米药物的多功能化，化疗药与短肽通过二硫键连接能够响应肿瘤细胞内高表达的GSH从而提高多肽药物的特异性，到达肿瘤部位才能发生响应释药，同时长肽末端连接的近红外荧光可以实现药物的可视化递送，主动靶向到肿瘤后并发挥一定的光热和光动力效应实现对肿瘤的诊疗一体化。静电相互作用两亲性多肽具有如下显著优势：(1)易于化学修饰，组装体尺寸、形状和表面物理化学性质可精细调控；(2)保持多肽组装体的净电荷接近电中性，提高组装体在体内的循环时间；(3)到达肿瘤部位后响应肿瘤微酸环境，解组装后组装体尺寸由大变小有利于化疗药物的深层递送；(4)光学治疗对外层肿瘤进行杀伤，同时结合化疗药的深层递送实现对肿瘤的全方面联合治疗。

发明内容

本发明解决了现有技术中纳米载体对肿瘤细胞的靶向性不好，不能实时追踪药物在肿瘤的分布，同时解决了化疗药物不能很好的深层递送以及细胞摄取效率较低的问题和单一作用模式带来的弊端，可以实现抗肿瘤药物、光热和光动力协同作用。本发明提供了一种新的主动靶向型两亲性多肽复合纳米胶束前药，具有主动靶向功能的待负电荷的第一多肽的N端偶联疏水性烷基链，且在多肽的侧链修饰荧光功能分子，第二多肽通过二硫键与带正电荷的第二多肽连接，两者通过静电相互作用和亲疏水作用共组装得到主动靶向型两亲性多肽复合纳米胶束前药。

根据本发明的第一方面，提供了一种主动靶向型两亲性多肽复合纳米胶束前药，包括带负电荷的第一多肽和带正电荷的第二多肽，该复合纳米胶束前药由带负电荷的第一多肽和带正电荷的第二多肽通过静电相互作用和亲疏水作用共组装得到；

所述第一多肽的氨基酸序列为Lys-AA_m-Gly-Arg-Gly-Asp-Ser，其中AA为天冬氨酸或谷氨酸，所述m取值为1、2、3或4；所述第二多肽的氨基酸序列为Cys-BB_n，其中BB为赖氨酸、精氨酸或组氨酸，所述n取值为1、2、3或4；

所述第一多肽N端的氨基与疏水烷基链连接，第一多肽赖氨酸侧链的氨基与荧光分子连接；所述第二多肽中的半胱氨酸通过巯基共价连接抗肿瘤药物。

优选地，所述纳米胶束前药为球形结构，直径为40nm-200nm；

优选地，所述纳米胶束前药的直径为80-150nm；