[发明专利]一种基于MALDI-TOF/TOF表征甘油三酯进行大豆和大豆油的产地溯源方法

权利要求书

1.一种基于MALDI-TOF/TOF表征甘油三酯进行大豆和大豆油的产地溯源方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1.标准样品制备：将具有明确地区的不同产地的大豆样品分别经过压榨得到不同产地的标准样品，使用棉签蘸取标准样品印在含有基质的靶板上，所述大豆样品来源于至少两个不同产地；

S2.标准样品的质谱数据采集：用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪分别采集不同产地的所述标准样品的质谱数据信息，获得所述标准样品的高分辨质谱数据；

S3.靶向化合物的确定：将步骤S2获得的高分辨质谱数据中的甘油三酯化合物质谱数据与脂类化合物数据库中的标准甘油三酯化合物数据进行匹配，确定所述标准样品的甘油三酯靶向化合物；

S4.大豆和大豆油产地溯源鉴定模型建立：确定甘油三酯靶向化合物后，将甘油三酯靶向化合物对应的甘油三酯化合物高分辨质谱数据通过分析软件进行归一化和平均处理之后，将处理后的数据进行主成分分析法、偏最小二乘法-判别分析法和正交偏最小二乘法回归分析法中的一种或多种方式处理，以获得标准样品中不同产地大豆油脂特征分布规律，构建基于脂质组学的大豆和大豆油产地溯源鉴定模型；

S5.结果预测：将待检测的大豆样品经过压榨得到待检测大豆油样品，使用棉签蘸取待检测大豆油样品印在含有基质的靶板上，通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪采集待检测大豆油样品的甘油三酯化合物高分辨质谱数据，导入所述大豆和大豆油产地溯源鉴定模型中，进行待检测大豆的产地溯源预测；

所述步骤S4还包括盲样验证步骤，所述盲样验证步骤包括：选取同一地区的多个大豆验证样品，将具有明确地区的大豆验证样品通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪采集的甘油三酯化合物高分辨质谱数据导入步骤S4中的所述大豆和大豆油产地溯源鉴定模型中，验证所述大豆验证样品的产地溯源准确度；

所述步骤S3的确定靶向化合物的方法包括：根据所述高分辨质谱数据中的目标物分子量范围，将大豆油样品中的高分辨质谱数据分为2个区域：分子量在800-1000的第一区域，分子量在700-800的第二区域，所述第一区域与第二区域是大豆油油脂代谢特征区域，将脂类化合物数据库中的分子量范围在700-950之间的动植物来源甘油三酯化合物与第一区域和第二区域中的大豆油甘油三酯化合物进行匹配筛选，确定分子量范围在850-930Da之间的64个大豆油中的甘油三酯化合物为甘油三酯靶向化合物；

所述步骤S1中，每6个标准样品使用聚乙二醇校准一次，每个标准样品平行测定三次；

所述步骤S4中还包括对大豆和大豆油产地溯源鉴定模型的优化步骤，所述优化步骤包括：通过大豆和大豆油产地溯源鉴定模型的VIP值确定所述甘油三酯靶向化合物中贡献值度大的部分甘油三酯化合物，选取38个甘油三酯化合物作为优选后的甘油三酯靶向化合物，包括分子量如下的甘油三酯化合物：853.7、854.7、875.7、876.7、877.7、878.7、879.7、880.7、881.7、882.8、883.7、893.7、894.7、895.7、896.7、897.7、898.7、899.7、900.7、901.7、902.7、903.7、904.7、905.7、906.7、907.7、909.7、915.7、916.7、917.7、918.7、919.7、920.7、921.7、922.7、923.7、908.7；

所述步骤S4中，将所述标准样品中的甘油三酯化合物高分辨质谱数据依次进行归一化和平均处理、正交偏最小二乘法回归分析法处理，构建基于脂质组学的OPLS-DA大豆和大豆油产地溯源鉴定模型。

2.根据权利要求1所述的大豆和大豆油的产地溯源方法，其特征在于，所述基质为2，5-二羟基苯甲酸、芥子酸和2-氰基-4-羟基肉桂酸中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的大豆和大豆油的产地溯源方法，其特征在于，所述基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪在Flex Control软件上采集所述标准样品的高分辨质谱数据，所述甘油三酯化合物高分辨质谱数据在Flex Analysis软件上定性定量进行归一化和平均处理分析。