[发明专利]黄曲霉毒素标准物质及其制备方法和大米黄曲霉毒素B1标准物质

权利要求书

1.一种黄曲霉毒素标准物质的制备方法，其特征在于，该方法包括：选择天然条件下被黄曲霉毒素污染的谷物样品，然后依次对其进行粉碎、混匀和烘烤，得到所述黄曲霉毒素标准物质。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述被黄曲霉毒素污染的谷物样品中黄曲霉毒素的含量与国标限量值相当或高于国标限量值；

优选的，该方法还可选地包括：将被黄曲霉毒素污染的谷物样品与同类谷物的空白样品进行混配，以使得混配后物料中黄曲霉毒素的含量为国标的0.8-3倍。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述黄曲霉毒素为黄曲霉毒素B1；和/或

所述谷物样品为大米。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述粉碎后所得谷物粉的粒径小于80μm；

优选的，所述粉碎在超细粉研磨机中进行。

5.根据权利要求1-4中任意一项所述的方法，其中，所述混匀的方法包括：在50-200rpm的条件下连续搅拌18-30小时；

优选的，所述混匀在卧式搅拌机中进行。

6.根据权利要求1-5中任意一项所述的方法，其中，所述烘烤的条件包括：温度为80-150℃，时间为30-120min。

7.根据权利要求1-6中任意一项所述的方法，其中，该方法还包括：将烘烤后的谷物粉在氮气气氛下进行包装。

8.根据权利要求1-7中任意一项所述的方法，其中，该方法还包括：在混匀后的任意环节检测样品的均匀性。

9.根据权利要求1-8中任意一项所述的方法，其中，该方法还包括对所述黄曲霉毒素标准物质进行定值；

优选的，所述定值的方法为采用一种检测方法并联合多方检测；

优选的，所述检测方法包括：

(1)将所述黄曲霉毒素标准物质样品加入至甲醇-水溶液，混匀后进行超声处理，然后固液分离获得上清液；

其中，相对于1g所述黄曲霉毒素标准物质，甲醇-水溶液的用量为15-25ml；和/或

甲醇-水溶液中甲醇的含量为60-80体积％；和/或

所述超声的条件包括：温度为15-45℃，时间为15-40min；

(2)将所述上清液加入含有TritonX-100的PBS缓冲液中，得到上样液，然后采用SPE固相萃取柱或免疫亲和柱进行黄曲霉毒素的提纯，得到含有黄曲霉毒素的纯化液；

(3)采用液相色谱法测定所述纯化液中黄曲霉毒素的含量；

其中，所述液相色谱法的条件包括：

a)流动相：A相为水；B相为乙腈-甲醇，乙腈和甲醇体积比为1：0.8-1.2；

b)等梯度洗脱条件：A相65-70％；B相30-35％；

c)色谱柱：C18柱；

d)流速：0.8-1.2mL/min；

e)柱温：35-45℃；

f)进样量：45-55μL；

g)光化学柱后衍生器；

h)激发波长：350-370nm；发射波长：430-450nm。

10.权利要求1-9中任意一项所述的方法制备得到的黄曲霉毒素标准物质。

11.一种大米黄曲霉毒素B1标准物质，该标准物质中黄曲霉毒素B1的含量为9-35μg/kg。