[发明专利]一种基于过渡金属硫化物的双模式电化学生物传感器的制备与应用

权利要求书

1.一种基于过渡金属硫化物的双模式电化学生物传感器的制备方法，包括以下步骤：

(1)将玻碳电极用抛光粉打磨，再使用去离子水清洗，将电极置于5 mmol/L铁氰化钾溶液中，并在-0.2~0.6 V电位下进行扫描，使峰电位的差值小于110 mV；

(2)将8 μL，1 ~ 3 mg/mL 聚苯胺/银纳米粒子 (PANI/Ag NPs)溶液滴加在电极上，室温下干燥；

(3)将8 μL，1 ~ 2 μg/mL 细胞角蛋白19片段 (cytokeratin 19 fragment antigen21-1,CYFRA21-1)抗体滴加在电极上，室温下干燥之后，用PBS清洗，除去多余抗体，室温下干燥；

(4)将3 μL，质量分数为1 ~ 2% BSA溶液滴加于电极上，用以封闭非特异性结合位点，干燥之后使用PBS洗去多余BSA，室温下干燥；

(5)将8 μL，0.01 pg/mL ~ 50 ng/mL一系列不同浓度的CYFRA21-1抗原标准溶液滴加于电极上，室温下干燥之后，用PBS清洗，除去多余抗原，室温下干燥；

(6)将8 μL，3~5 mg/mL g-C₃N₄-NiCo₂S₄-CNTs-Ab₂滴加于电极上，室温下干燥之后，用PBS清洗，除去多余二抗，室温下干燥。

2.如权利要求1所述的一种基于过渡金属硫化物的双模式电化学生物传感器的制备方法 ，其所述的聚苯胺/银纳米粒子复合材料的制备步骤如下：

(1) Ag NPs的合成

通过使用硼氢化钠 (NaBH₄) 化学还原硝酸银 (AgNO₃) 合成了Ag NPs；NaBH₄ / AgNO₃的摩尔比为6~8，浓度为0.002 M的AgNO₃，十二烷基硫酸钠 (SDS) / AgNO₃的重量比为3~4；通过溶解所需量的AgNO₃制备溶液在100 mL蒸馏水中；将NaBH₄和SDS溶解在100 mL蒸馏水，然后加入AgNO₃；将制备的混合溶液搅拌30分钟后，获得Ag NPs的黄红色胶体溶液；

(2) PANI/Ag NPs的合成

PANI/Ag NPs纳米粒子由苯胺在Ag NPs存在下原位氧化聚合而成；将0.03~0.05 mL苯胺单体溶解在10 mL预先制备的Ag NPs中；然后在室温下连续搅拌下，将10 mL含0.3~0.5 g十二烷基苯磺酸(DBSA)和0.1~0.2 g过硫酸铵(APS)的酸性溶液缓慢加入苯胺溶液中，直到获得深绿色的胶体溶液；通过7000 r/min离心8分钟并洗涤来收集制备的PANI/Ag NPs复合物。