[发明专利]一种氘标记的美替诺龙稳定性同位素标记化合物

说明书

本发明提供了一种氘标记的美替诺龙稳定性同位素标记化合物，其结构式如式II所示，以化合物I为原料，在氘标记的溶剂即氘源中，在碱的存在下，在适宜的温度下，进行H‑D交换反应得到。本发明所述的氘标记的美替诺龙稳定性同位素标记化合物，对天然丰度美替诺龙结构中的1位甲基‑H、羰基α位的2位烯键H和4位亚甲基H进行了氘置换，与美替诺龙相差6个质量数，质谱响应数据有明显的区别，完全满足同位素稀释质谱法所需内标物的物性要求，其制备方法工艺设计合理，实验过程可控，操作简便，制备得到的目标产物纯度高，收率达到90.0％左右，且最终产物的同位素丰度达到93.5％‑95.0％左右，重现性较好，可为食品安全检测行业提供标准样品。

技术领域

本发明属于药物合成领域，尤其是涉及一种氘标记的美替诺龙稳定性同位素标记化合物。

背景技术

美替诺龙(Methenolone)，中文名17β-羟基-1-甲基-5α-雄甾-1-烯-3-酮，是一种温和的合成代谢类固醇，具有极低的雄激素生成作用。可以用来让人体在低碳水的情况下保持肌肉饱满度和合成代谢能力，还可以提高人的免疫能力。由于它对人的肝脏任何副作用小，而且很少引发高血压症状，被认为是“所有类固醇中最安全的”。具有极大的治疗价值。在临床上长会用作蛋白同化制剂，服用或者误服将会对运动员的成绩造成较大影响。

世界反兴奋剂机构(World Anti-Doping Agency，WADA)在《2013年违禁物质名单》中已将包括美替诺龙、美曲勃龙、诺龙、美睾酮、去氢甲睾酮、氟氢甲睾酮、康力龙、康复龙等78种合成类固醇药物列为违禁药品。近年来在兴奋剂检查中频繁发生运动员美替诺龙等合成类固醇阳性事件。因此，有效的检测手段运用于各种食材的检测以及人体的检测，显得尤为重要。

日前，关于美替诺龙的检测方法主要有HPLC-UV法、LC-MS法和GC-MS法等。尽管GC-MS方法相较于前两者灵敏度较高、通用性较强，广泛应用于运动员的血样、尿样以及各类保健品和食品的分析中，但是其灵敏度还是有一定的局限性，对违禁品浓度有一定的要求，当浓度低于检测阈值时，就无法满足要求，而同位素稀释质谱法(Isotope Dilution MassSpectrometry,IDMS)很好的解决了这一问题。同位素稀释质谱法采用稳定性同位素标记化合物作为内标试剂，很好地结合了色谱的分离能力和质谱的定性能力，具有检测限低，不受基质干扰等优点，己被定为国际上食品安全检测最权威的仲裁检测方法，并被美国、欧盟、日本等发达国家列为相关检验标准，IDMS是一种可用于微量、痕量和超痕量元素权威的测量方法。另外，稳定同位素标记试剂作为内标试剂应用于同位素稀释质谱法时，一般要求有至少3个质量数的差异。

当前，专利(DE1135900、DE1122947)及文献(张沪跃，复旦学报(医学版)，2002)等对美替诺龙及其衍生物的合成方法均有报道，天然丰度的美替诺龙已经实现了工业化生产。但关于其同位素标记化合物的文献报道相对较少，其中文献(Von H.Breuer，DeutscheMedizinische Wochenschrift，1962)中报道了美替诺龙醋酸酯-¹⁴C₁的合成，该反应中使用了昂贵的重氮甲烷-¹⁴C₁,不仅成本高，具有危险性，而且相对分子质量与自然丰度的美替诺龙相差不大，无法满足内标试剂的要求。此外，文献(Paul-E.Schulze，ChemischeBerichte,1968)也报道了美替诺龙-T₁的合成。

发明内容

有鉴于此，本发明旨在提出一种氘标记的美替诺龙稳定性同位素标记化合物，以为更准确的定量检测美替诺龙的痕量残留提供标准试剂。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种氘标记的美替诺龙稳定性同位素标记化合物，所述化合物的结构式如式II所示：

如上述所述的氘标记的美替诺龙稳定性同位素标记化合物的制备方法，包括以下步骤：