[发明专利]一种三环单萜类化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种三环单萜类化合物及其制备方法和应用，本发明的化合物对小鼠巨噬细胞系RAW 264.7有一定的保护作用，可以显著抑制PGE₂的活性，具有较为显著的抗炎活性。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，尤其涉及一种三环单萜类化合物及其制备方法和应用。

背景技术

炎症是机体对有害刺激所产生的一种重要防御机制，炎症反应是机体最基本的抗损伤反应。尽管它可以促进伤口的愈合,并便于捕获微生物,但也能带来很多伤害，如引起关节炎、哮喘以及机体失调,因此抗炎药应运而生。但当今的抗炎药物存在很多问题，如引起胃部不适、增加心脏病发作的危险率等，所以，寻找安全有效的抗炎药仍是我们不懈努力的目标。其中前列腺素E₂(prostaglandins E2，PGE₂)是参与炎症、疼痛等多种生理病理机制过程的活性物质。因此能有效抑制PGE₂的释放的化合物通常会是一个很好的成药物质。

中药是我国医药文化的瑰宝，随着国家对中药开发的逐步重视，优选健康、安全且功效确切的中药，受到消费者的广泛青睐。热毒宁注射液由金银花、栀子和青蒿三味中药精制而成，具有清热、疏风、解毒的功效，临床上主要用于治疗外感风热所致的感冒、咳嗽、上呼吸道感染、急性支气管炎等症，其临床疗效确切、效果显著。但作为中药注射剂，其针对具体病症有效成分不明确的特点给安全性也带来了一定隐患。因此有必要对其中的药理活性成分进行更深入的研究。

发明内容

本发明旨在对热毒宁注射液的药理活性成分进行更深入的研究，发现其发挥抗炎作用的活性成分。

有鉴于此，本发明提出了三环单萜类化合物或其光学异构体、或其外消旋体、其溶剂化物、前药分子、代谢物或其药学上可接受的盐，该化合物具有式I结构：

本发明还提出了一种式I所示化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1：对热毒宁注射液成品进行浓缩，得到浓缩液；本发明对浓缩的方法没有特殊限制，本领域公知的用于浓缩中药注射剂的方法均可，本发明优选采用减压浓缩；

步骤2：将得到的浓缩液经大孔吸附树脂柱分离，以纯化水洗脱后，弃去洗脱液，洗脱液为乙醇与水的体积比为(x)：(100-x)的溶液，其中，0≤x≤95；优选依次以(5～10)％的乙醇水溶液、(25～30)％的乙醇水溶液、(45～50)％的乙醇水溶液、(65～70)％的乙醇水溶液和(90～100)％乙醇水溶液梯度洗脱；更优选依次以10％、30％、50％、70％、95％不同浓度的乙醇进行梯度洗脱；其中，每种洗脱液的用量均为1.5～5倍柱体积，更优选为3～4倍柱体积；另外需要指出的是，5％的乙醇水溶液是指，乙醇水溶液中乙醇与水的体积比为5:95，其它百分含量的乙醇水溶液表示的含义与该解释相同；

步骤3：取(90～100)％或优选地95％乙醇水溶液洗脱部位，经100-200目硅胶柱色谱分离，以二氯甲烷-甲醇为洗脱剂进行梯度洗脱，其中洗脱用的二氯甲烷-甲醇体积比依次为1:0、(60～30):1、(30～15):1、(15～5):1、0:1；更优选地依次为1:0、49:1、19:1、9:1、0:1；

步骤4：取二氯甲烷-甲醇(60～30):1、或优选49:1的馏分，再经100-200目硅胶柱色谱分离，石油醚-乙酸乙酯梯度洗脱，其中洗脱用石油醚-乙酸乙酯体积比依次为1:0、(20～10):1、(10～5):1、(5～1):1、0:1；优选1:0、19:1、9:1、4:1、0:1，收集石油醚-乙酸乙酯比例为(10～5):1优选9:1的馏分，经制备液相HPLC分离。

具体地，所述大孔吸附树脂选自D101型大孔吸附树脂、HP-20型大孔吸附树脂、HPD-100型大孔吸附树脂、HPD-100A型大孔吸附树脂和HPD-300型大孔吸附树脂中的一种或几种。