[发明专利]一种用于光热-免疫联合治疗的抗肿瘤自愈合水凝胶的制备方法

说明书

本发明提供了一种用于光热‑免疫联合治疗的抗肿瘤自愈合水凝胶的制备方法。该方法具有制备简单、药物分布均一、生物相容性好、以及近红外光响应性特点，在808 nm激光的照射下具有光热效应，既可杀死局部肿瘤细胞，又可促进水凝胶自愈合，增强与周围组织的贴合。同时，该水凝胶可植入于肿瘤术后切除部位，用于局部光热治疗及抗肿瘤免疫佐剂缓释。本发明以聚乙烯醇(PVA）作为主体，装载二硫化钼（MoS₂）纳米片和免疫佐剂咪喹莫特（R837），通过油浴法制备可植入体内的自愈合水凝胶药物支架，并结合免疫检查点阻断有望用于抑制术后肿瘤复发和转移。

技术领域

本发明涉及一种用于光热-免疫联合治疗的抗肿瘤自愈合水凝胶的制备方法，属于纳米复合材料制备和生物医学工程技术领域，特别涉及生物可降解聚合物材料与无机纳米材料形成的复合材料的制备方法。

背景技术

乳腺癌是全世界女性最常见的恶性肿瘤，也是女性中癌症死亡的主要原因。据估计2018年全球有超过860万女性被诊断患有癌症，其中乳腺癌患者占比例高达24.2%。在将近一半的癌症死亡病例中，因乳腺癌而死亡的女性占15.0%，同时发病率及死亡率每年都在不断增加。虽然中国不是乳腺癌高发的国家，但研究显示，自1990年至今，中国乳腺癌发病増长速度比全球平均水平高2倍多。尤其是近年来，我国乳腺癌发病率的增长速度甚至比高发国家高出1%-2%，同时乳腺癌的发病率高峰期比西方国家女性一般要早10-15年。具有高复发、高转移、高致死率等特性的三阴性乳腺癌（TNBC）是最常见的乳腺癌之一，TNBC 是危害女性生命健康的首要重大疾病。如何实现TNBC的有效治疗是癌症治疗领域面临的重大挑战。

当前TNBC的临床治疗效果并不理想，手术虽然能够清除绝大部分宏观可见的肿瘤组织，但术后残留的微肿瘤导致复发率高；化疗及放疗虽然对癌细胞的杀伤力较强，可以降低术后复发与转移，但是这两种治疗方式具有较高的毒副作用，对患者自身的伤害极大；靶向治疗虽然毒副作用小，能够起到针对性治疗效果，但是靶向药物的价格较贵且容易产生耐药性，同时靶向药物的药物肿瘤内输送效率依然很低；局部给药的方式虽能大大提高局部药物浓度，但其治疗周期较短、生物安全性仍需改进，同时高剂量的光热和光动力治疗会对机体造成不可逆的损伤等。因此亟需一种有效的、安全的治疗方式，不仅能够抑制TNBC的术后局部复发，而且具有长期防止TNBC肿瘤转移的效果。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的缺陷，提出一种用于光热-免疫联合治疗的抗肿瘤自愈合水凝胶的制备方法，以解决上述背景技术提出的问题。

本发明的技术方案如下：一种用于光热-免疫联合治疗的抗肿瘤自愈合水凝胶的制备方法，包括如下步骤：

步骤（1）、首先配制不同浓度的R837溶液，利用紫外分光光度计，测得不同浓度的R837溶液在波峰处的吸收强度，由此作出R837在波峰处吸收强度随浓度的变化曲线；

步骤（2）、制备MoS₂纳米片，其方法为：

在Schlenk 管中装入MoS₂ 粉末，将管密封后抽真空，再通入高纯Ar气体以确保管中没有O₂存在；抽取正丁基锂溶液，滴加管中，之后将Schlenk管密封，放入超声清洗仪中超声；超声后静置分层，将上层的液体取出，在无氧无水的情况下，向管中加入除氧的超纯水10 mL，并在超声的条件下通过水与锂反应产生的氢气使MoS₂的片层相互剥离开来，获得悬浊液状的产物；将所得产物移入离心管中，加入等体积的无水乙醇，混合均匀后离心，去除上层清液，保留沉淀物，再通过无水乙醇清洗、离心；最后通过加入超纯水进行清洗并离心，得到的黑色沉淀用超纯水进行分散，即可得到MoS₂纳米片溶液；

步骤（3）、对MoS₂纳米片进行表面功能化：将DTT溶解于MoS₂纳米片溶液中，通入氮气进行除氧以防止在反应过程中DTT的硫醇基团被氧化，混合溶液在室温下持续搅拌24h；搅拌24h后，通过透析的方法除去过量的DTT，从而得到DTT修饰的MoS₂纳米片；