[发明专利]冠心病风险评估、诊断的circRNA标志物及其检测试剂和试剂盒

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于冠心病风险评估和/或诊断的circRNA标志物，该circRNA标志物为hsa_circ_0001946，其cDNA序列如SEQ ID NO：1所示，对于冠心病具有很高的灵敏度和特异性，其区分冠心病患者外周血和正常对照外周血的AUC可达到0.838，灵敏度达到0.809，特异度达到0.736。因此，该circRNA标志物可用于冠心病的患病风险评估，为冠心病诊断提供理论参考依据，提高冠心病的预防和诊断水平。并且，在结合circRNA标志物、冠心病家族史、高血压和糖尿病这四个变量进行联合分析时，可进行冠心病诊断，诊断结果准确性高。本发明还涉及该circRNA标志物的检测试剂和试剂盒，均包括针对hsa_circ_0001946的特异性引物，即如SEQ ID NO：2所示的特异性上游引物，以及如SEQ ID NO：3所示的特异性下游引物。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种用于冠心病风险评估、诊断的circRNA标志物及其检测试剂和试剂盒。

背景技术

冠状动脉粥样硬化性心脏病，俗称冠心病，是全球性死亡的主要原因。在中国，目前成年人中理想的心血管健康比例较低，只有0.2％，并且有1100万冠心病患者，是导致早期死亡的第二大原因。尽管目前冠心病的负担已成为重大的公共卫生学问题，但努力主要集中在疾病的治疗上而不是在预防上。因此，将重点从干预转移到同等重视冠心病的预防将具有重大意义。

环状RNA(circular RNA，circRNA)是一类新发现的内源性非编码RNA(non-codingRNA，ncRNA)，是RNA领域的最新研究热点。与含有5’帽状结构与3’腺苷酸尾巴的线性RNA不同，circRNA形成特殊的共价闭合环状结构，既没有5’-3’极性，亦无多聚腺苷酸尾巴。circRNA是一类广泛存在于哺乳动物细胞中的内源性RNA分子，在转录后水平具有调控基因表达的作用。circRNA在人体细胞中广泛表达，并在肿瘤的发生过程中起着较为重要的作用。其表达具有高稳定性，而且在组织或发育阶段的表达也具有特异性。circRNA可能成为癌症早期诊断标志物，深入研究circRNA的表达及调控机制可提高相关疾病的预防和诊断水平。

CircRNA CDR1as(也称为hsa_circ_0001946，也是ciRS-7)是明星分子，既往已有研究显示，CircRNA CDR1as与心肌梗死、肿瘤等疾病存在关联。但是，hsa_circ_0001946与冠心病之间的关联性研究尚未见报道。

发明内容

为此，需要提供一种用于冠心病风险评估、诊断的circRNA标志物。该circRNA标志物可为冠心病诊断提供理论参考依据，且对于冠心病具有很高的灵敏度和特异性，可以作为新型的生物标志物用于冠心病的患病风险评估和/或诊断，提高冠心病的预防和诊断水平。

为实现上述目的，本发明的第一方面提供了一种用于冠心病风险评估和/或诊断的circRNA标志物，所述circRNA标志物为hsa_circ_0001946，其cDNA序列如SEQ ID NO：1所示。

优选的，所述冠心病包括单纯冠心病和冠心病合并症，所述冠心病合并症包括冠心病合并高血压、冠心病合并高脂血症和冠心病合并糖尿病。

本发明的第二方面提供了一种用于定量检测本发明第一方面所述circRNA标志物的检测试剂，所述检测试剂包括针对hsa_circ_0001946的特异性引物；

所述特异性引物的序列如下：

上游引物：AGTCTTCCATCAACTGGCTCA(如SEQ ID NO：2所示)，以及

下游引物：GACACAGGTGCCATCGGA(如SEQ ID NO：3所示)。

优选的，所述检测试剂还包括内参引物，所述内参引物为GAPDH，所述内参引物的序列如下：