[发明专利]水溶性荧光染料偶联物的纯化方法在审
申请号: | 202110295555.3 | 申请日: | 2021-03-19 |
公开(公告)号: | CN115109435A | 公开(公告)日: | 2022-09-27 |
发明(设计)人: | 尚风琴;张少桥;王一婷;李汉东;章文蔚 | 申请(专利权)人: | 湖北华大基因研究院 |
主分类号: | C09B67/54 | 分类号: | C09B67/54;B01D15/36;B01D15/32 |
代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 肖阳 |
地址: | 430000 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 水溶性 荧光 染料 偶联物 纯化 方法 | ||
1.一种水溶性荧光染料偶联物的纯化方法,其特征在于,包括:对待纯化样品依次进行阴离子交换层析纯化和反相制备液相色谱纯化,得到纯化产品。
2.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述阴离子交换层析纯化所采用的阴离子交换树脂为DEAE树脂。
3.根据权利要求2所述的纯化方法,其特征在于,所述DEAE树脂的质量与所述待纯化样品的质量比例为(8~12):1。
4.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述阴离子交换层析纯化包括:
(1)将阴离子交换树脂装柱,并利用水进行冲洗;
(2)将待纯化样品上样,利用2~5倍柱体积的水进行冲洗;
(3)利用第一TEAB水溶液和水对所述待纯化样品进行梯度洗脱。
5.根据权利要求4所述的纯化方法,其特征在于,所述第一TEAB水溶液的浓度为0.5~1.5mol/L。
6.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述反相制备液相色谱纯化中,利用第二TEAB水溶液和乙腈对所述阴离子交换层析纯化获得的样品进行梯度洗脱。
7.根据权利要求6所述的纯化方法,其特征在于,所述第二TEAB水溶液的浓度为0.02~0.15mol/L。
8.根据权利要求1所述的纯化方法,其特征在于,所述水溶性荧光染料偶联物包括荧光染料和连接臂。
9.根据权利要求8所述的纯化方法,其特征在于,所述荧光染料选自罗丹明、荧光素、香豆素、花青、芘、氟硼荧染料、Alexa系列染料、ATTO系列染料及其衍生物中的至少之一。
10.根据权利要求8所述的纯化方法,其特征在于,所述连接臂具有以下结构中的至少之一:
其中,R为卤素原子、C1-8烷基、C1-8烷氧基、氨基、氰基、硝基、羧基或叠氮基。
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