[发明专利]一种细菌光热检测试剂、试剂盒及检测方法

说明书

本发明属于微生物检测技术领域，具体涉及一种细菌光热检测试剂、试剂盒及检测方法。将MPBA功能化至AuNPs表面，MPBA包含两个官能团：可与Au结合的巯基基团，以及与细菌细胞壁中的肽聚糖共价结合的硼酸基团。当体系不存在细菌时，继续添加过量的MPBA可以通过形成环酯选择性地结合顺式二醇基团，引起MPBA‑AuNPs聚集，使溶液从红色转变为蓝色。而当体系中存在细菌时，将MPBA‑AuNPs固定在细菌表面，过量的MPBA引起AuNPs聚集不明显。由于聚集的和未聚集状态的AuNPs的光热转换效率不同，经激光器照射后，溶液产生的温度变化不同，通过普通数字温度计检测温度变化即可定量转化为对应细菌浓度。

技术领域

本发明属于微生物检测技术领域，具体涉及一种细菌光热检测试剂、试剂盒及检测方法。

背景技术

微生物的快速检测在食品安全、水环境监测、公共安全和医疗诊断等方面具有重要意义。传统的微生物检测的方法主要包括培养法、聚合酶链式反应（PCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）等，但这些方法往往具有耗时、灵敏度低和特异性差或者需要专业的设备和专业人员的弊端。

而近年来，随着生命科学、物理学、分析化学、纳米科学以及信息科学和其他相关技术的发展，基于纳米材料的比色法在分析检测领域引起了极大的关注，但比色法的信号读取方式分为两种，一种基于肉眼的颜色判断，灵敏度较低；另一种需借助酶标仪或分光光度计，依赖于大型仪器的方式无法满足床旁检测简便、即时的需求。

基于便携式温度计的生物传感器在快速检测得到广泛讨论，但其在微生物检测领域应用较少，且已有的基于温度计的微生物检测方法操作繁琐。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术存在的缺点和不足，而提供一种细菌光热检测试剂、试剂盒及检测方法。

本发明的第一方面，提供一种细菌光热检测试剂，其包含巯基苯硼酸（MPBA）修饰的纳米金颗粒。其中，MPBA具体可选择4-MPBA或3-MPBA。

进一步的，MPBA修饰的纳米金颗粒的制备为：用柠檬酸盐还原法合成胶体金纳米颗粒，得到柠檬酸根阴离子稳定的胶体金纳米颗粒混合体系，然后加入MPBA反应，得到MPBA修饰的纳米金颗粒。

进一步的，所加入的MPBA浓度为0.04 mM，加入MPBA后反应时间为20 min。

本发明的第二方面，提供一种细菌光热检测试剂盒，其包含试剂一、试剂二、激光器、温度检测装置；

所述试剂一为如上所述的细菌光热检测试剂；

所述试剂二包含MPBA。

进一步的，所述激光器可形成照射功率为1 W/cm²的激光。

本发明的第三方面，提供一种细菌光热检测方法，包括以下步骤：

（1）将如权利要求1-3任一项所述的细菌光热检测试剂与待测溶液反应；

（2）在步骤（1）反应结束后的体系中加入MPBA，进行反应；

（3）将步骤（2）反应结束后的体系用激光照射，并使用温度检测装置监测温度变化。

进一步的，步骤（1）中，反应的时间为15-45min。

进一步的，步骤（2）中，MPBA加入的浓度为0.5 mM，反应时间为30 min。

进一步的，步骤（3）中，激光照射采用激光器照射功率的1 W/cm²，照射时间3 min。