[发明专利]一种利用MALDI-TOF MS技术检测牛奶中肽和/或蛋白质的方法

说明书

本发明提供了一种利用MALDI‑TOF MS技术检测牛奶中肽和/或蛋白质的方法。本发明中将牛奶样品进行稀释，与基质溶液混合后，在靶板上进行点样，干燥后利用MALDI‑TOF MS仪器对牛奶样品中所含的肽和/或蛋白质进行MALDI数据采集，通过对质谱谱图的比较和统计学分析，找出不同牛奶样品中的差异分子。本发明所需样品量少，无需前处理，步骤简单、检测迅速、结果直观，分析所得的差异肽和/或蛋白质的质谱峰或峰的组合可作为特征，可用于检测不同品牌、来源、脂肪含量的牛奶样品，以及可用于质控或掺假牛奶的识别。

技术领域

本发明属于质谱检测技术领域。更具体地，涉及一种利用MALDI-TOF MS技术检测牛奶中肽和/或蛋白质的方法。

背景技术

随着生活水平的提高，牛奶已成为人们日常生活中必不可少的食物之一，可有些不法商家在销售生产牛奶时为了谋取更大的利润，常在所销售的牛奶内添加不同的化学物质，例如掺杂一些羊奶或者其他奶，达到提升牛奶利润的目的。随着这种现象的普及，建立一种快速检测牛奶中蛋白质的方法成为当下热门的研究方向之一。如专利CN106198692A提供了一种检测牛乳中A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白的方法，具体是：(1)将待测样品依次进行加热、离心、冷冻及解冻，以便得到待测储备液；(2)将所述待测储备液进行预处理，以便得到待测液，其中，所述预处理包括将所述待测储备液与预处理液进行混合；(3)利用毛细管电泳法对所述待测液进行检测，以便确定牛乳中是否含有A1β-酪蛋白及A2β-酪蛋白。然而，该方法所用的毛细管电泳法存在检测时间长、检测成本高、检测结果灵敏度不高等缺点，且只能检测A1β-酪蛋白和A2β-酪蛋白两种蛋白，不能检测出其他的化学物质，无法打击市场上的掺假行为，难以适应现代化奶业的发展需要。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorptionionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF MS)是目前较为常用的质谱技术之一，由于具备使用简单、质谱重现性高、分析成本低、检测时间快等优点，成为全球许多生物医疗工程实验室的首选，但目前尚未有利用MALDI-TOF MS技术在高、中、低三个分子量范围内对牛奶样品中所含的肽和/或蛋白质进行检测。因此，开发出一种能够快速检测出牛奶中肽和/或蛋白质的方法，对于打击市场上的掺假行为具有相当的必要性。

发明内容

本发明要解决的是克服现有检测牛奶样品中肽和/或蛋白质的方法的缺陷和不足，提供一种利用MALDI-TOF MS技术检测牛奶中肽和/或蛋白质的方法。本发明中将牛奶样品进行稀释，与基质溶液混合后，在靶板上进行点样，干燥后利用MALDI-TOF MS仪器对牛奶样品中所含的肽和/或蛋白质进行MALDI数据采集，通过对质谱谱图的比较和统计学分析，找出不同牛奶样品中的差异分子。本发明所需样品量少，无需前处理，步骤简单、检测迅速、结果直观，分析所得的差异肽和/或蛋白质的质谱峰或峰的组合可作为特征，可用于检测不同品牌、来源、脂肪含量的牛奶样品，以及可用于质控或掺假牛奶的识别。

本发明的目的是提供一种利用MALDI-TOF MS技术检测牛奶中肽和/或蛋白质的方法。

本发明另一目的是提供上述方法在区分不同品牌、来源或脂肪含量牛奶方面的应用。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

本发明提供了一种利用MALDI-TOF MS技术检测牛奶中肽和/或蛋白质的方法，包括以下步骤：

S1.将牛奶样品进行稀释，与基质溶液混合后，在靶板上进行点样；

S2.待靶板上的牛奶样品干燥后，利用MALDI-TOF MS仪器对牛奶样品中所含的肽和/或蛋白质进行MALDI数据采集；

S3.通过对质谱谱图的比较和统计学分析，找出不同牛奶样品中的差异分子，进而检测出不同品牌、来源、脂肪含量的牛奶样品。