[发明专利]一种利用MALDI-TOF MS技术检测牛奶中肽和/或蛋白质的方法

权利要求书

1.一种利用MALDI-TOF MS技术检测牛奶中肽和/或蛋白质的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.将牛奶样品进行稀释，与基质溶液混合后，在靶板上进行点样；

S2.待靶板上的牛奶样品干燥后，利用MALDI-TOF MS仪器对牛奶样品中所含的肽和/或蛋白质进行MALDI数据采集；

S3.通过对质谱谱图的比较和统计学分析，找出不同牛奶样品中的差异分子，进而检测出不同品牌、来源、脂肪含量的牛奶样品。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述肽和/或蛋白质的分子量为高分子量、中分子量或低分子量；所述高分子量为20～220kDa；所述中分子量为2～32kDa；所述低分子量为500～5000Da。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，当所述肽和/或蛋白质的分子量为高分子量或低分子量时，步骤S1所述稀释为稀释10倍；当所述肽和/或蛋白质的分子量为中分子量时，步骤S1所述稀释为稀释100倍。

4.根据权利要求2所述方法，其特征在于，当所述肽和/或蛋白质的分子量为高分子量或中分子量时，步骤S1所述基质溶液为芥子酸溶液；当所述肽和/或蛋白质的分子量为低分子量时，步骤S1所述基质溶液为α-氰基-4-羟基肉桂酸溶液。

5.根据权利要求4所述方法，其特征在于，将芥子酸或α-氰基-4-羟基肉桂酸溶解于含有三氟乙酸和乙腈的溶液中，混合后离心收集，即得到所述基质溶液。

6.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于，步骤S1所述混合为将稀释后的牛奶样品与所述基质溶液按0.7～1.3：0.7～1.3的体积比混合。

7.根据权利要求2所述方法，其特征在于，当所述肽和/或蛋白质的分子量为高分子量时，步骤S2所述干燥后，将所述靶板上的样品水洗2～4次。

8.根据权利要求2所述方法，其特征在于，当所述肽和/或蛋白质的分子量为高分子量时，步骤S2所述数据采集的设置条件为：质量检测范围为20～220kDa，模式为线性模式，离子模式为正离子模式，离子类型为[M+H]⁺，离子源使用脉冲式激光，激光能量为89％，激光脉冲频率为2000Hz，激光脉冲次数为5次，1000shots/次，检测电压为3.086kV；

当所述肽和/或蛋白质的分子量为中分子量时，步骤S2所述数据采集的条件为：质量检测范围为2～32kDa，模式为线性模式，离子模式为正离子模式，离子类型为[M+H]⁺，离子源使用脉冲式激光，激光能量为80％，激光脉冲频率为5000Hz，激光脉冲次数为5次，2000shots/次，检测器增益为20倍，检测电压为3.098kV；

当所述肽和/或蛋白质的分子量为低分子量时，步骤S2所述数据采集的条件为：质量检测范围为500～5000Da，模式为反射模式，离子模式为正离子模式，离子类型为[M+H]⁺，离子源使用脉冲式激光，激光能量为80％，激光脉冲频率为5000Hz，累加激光脉冲次数为5次，1000shots/次，检测器增益为15倍，检测电压为3.195kV。

9.权利要求1～8所述方法在区分不同品牌、来源或脂肪含量牛奶方面的应用。