[发明专利]泥螺多肽在制备骨髓间充质干细胞成骨分化促进剂中的用途

说明书

本发明属于干细胞技术领域，尤其涉及泥螺多肽在制备骨髓间充质干细胞成骨分化促进剂中的用途。本发明通过如下制备方法制备出一种泥螺多肽：将泥螺洗净，取软体组织，冻干粉碎，加入3倍重量的水，得到泥螺匀浆液；加入0.02倍泥螺匀浆液重量的木瓜蛋白酶，调节pH为6，55℃恒温水浴4小时，得到泥螺酶解液；95℃水浴加热20分钟，5000r/min离心取上清，得到粗泥螺提取液；将粗泥螺提取液经过孔径2nm的纳滤膜，得到细泥螺提取液；将细泥螺提取液置于真空冷冻干燥机中真空冷冻干燥，得到泥螺多肽。通过实验发现，本发明所制备的泥螺多肽能够有效的促进骨髓间充质干细胞成骨分化。

本案为分案申请，原申请的发明名称为一种促进间充质干细胞成骨分化的促进剂，原申请的申请日为：2020-06-22，原申请的申请号为：CN202010576883.6

技术领域

本发明属于干细胞技术领域，尤其涉及泥螺多肽在制备骨髓间充质干细胞成骨分化促进剂中的用途。

背景技术

在骨损伤的临床治疗工作中，治疗和预防大块骨缺损、术后骨不连以及骨质疏松已经成为骨科亟待解决的难题。传统的植骨手术损伤大，骨量有限，需要一种创伤小、安全有效的方法代替它，目前组织工程技术已经成为解决骨不连和骨缺损的重要方法，增强骨形成是有效治疗骨损伤的重要策略。

骨髓间充质干细胞是一类具有自我更新以及多向分化潜能的原始细胞，是体内成骨细胞的主要来源。骨髓间充质干细胞的增殖以及成骨分化对于维持成骨细胞的数量具有重要的意义。目前，组织工程技术常常会面临成骨细胞不足的问题，因此，寻找新的能够存进骨髓间充质干细胞成骨分化的物质是目前急需解决的问题。

由于海洋生物资源繁多，再生能力强，因此，海洋生物成为活性肽的重要来源。海洋生物因其生活环境的不同，而拥有独特的生理性状，从而存在许多具有特殊生物活性的物质，因而具有巨大的开发潜力。

泥螺属软体动物门、泥螺属，为太平洋西岸海水及咸淡水特产的种类。我国主要在宁波和辽宁的东港产泥螺。泥螺软体部分含有丰富的蛋白质和多肽。目前的研究显示，泥螺多肽具有抗肿瘤的作用，但是关于泥螺多肽在骨髓间充质干细胞成骨分化方面的研究目前尚无。

发明内容

本发明的目的在于提供一种泥螺多肽促进骨髓间充质干细胞成骨分化中的新用途。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

本发明提供了一种促进间充质干细胞成骨分化的促进剂，所述促进剂为泥螺多肽。

优选地，所述间充质干细胞为骨髓间充质干细胞。

优选地，所述泥螺多肽的制备方法如下：

（1）将泥螺洗净，取软体组织，冻干粉碎，加入3倍重量的水，得到泥螺匀浆液；

（2）加入0.02倍泥螺匀浆液重量的木瓜蛋白酶，调节pH为6，55℃恒温水浴4小时，得到泥螺酶解液；

（3）95℃水浴加热20分钟,5000r/min离心取上清，得到粗泥螺提取液；

（4）将粗泥螺提取液经过孔径2nm的纳滤膜，得到细泥螺提取液；

（5）将细泥螺提取液置于真空冷冻干燥机中真空冷冻干燥，得到泥螺多肽。

优选地，所述促进剂用于促进骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞。

此外，本发明提供了一种泥螺多肽在促进骨髓间充质干细胞成骨分化中的用途。

优选地，所述用途包括泥螺多肽在促进骨髓间充质干细胞成骨分化基因ALP、RUNX2和BGLAP表达中的用途。

优选地，所述泥螺多肽的制备方法如下：