[发明专利]一种多重标志物液态芯片及其制备方法

权利要求书

1.一种一抗-微球复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S10：对一抗进行脱盐处理，得到脱盐一抗；

S20：对微球进行活化操作，得到活化微球；在所述活化操作的过程中，使用含有表面活性剂的缓冲溶液对所述微球进行梯度清洗；

S30：将所述脱盐一抗与所述活化微球混合，并且震荡避温包被得到包被好的复合物，使用TBST磁珠保存液对所述包被好的复合物进行清洗，得到所述一抗-微球复合物。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S10中所述对一抗进行脱盐处理，具体包括以下步骤：

S11：使用PBS缓冲溶液对脱盐柱进行清洗；

S12：在所述脱盐柱中加入所述一抗，离心处理得到所述脱盐一抗；

所述离心处理为：在1500g的条件下离心1-2min。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤S20中所述对微球进行活化操作包括以下步骤：

S21：使用MES缓冲液对所述微球进行梯度清洗，得到清洗后的微球；

S22：将NHS和EDC与所述清洗后的微球充分混合，得到待清洗的活化微球；

S23：使用连接缓冲液对所述待清洗的活化微球进行清洗操作，得到所述活化微球；

所述MES缓冲液和/或所述连接缓冲液中含有质量浓度为2-5%的表面活性剂。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述微球与NHS和EDC混合的质量比为2000:(18-22):(9-11)。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述微球标记有磁性。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S30具体包括以下步骤：

S31：将所述脱盐一抗与所述活化微球混合，使用MES缓冲液将所述活化微球稀释至8-12mg/ml，然后用漩涡混合器充分混合，震荡避光包被16-20h，得到包被好的复合物；

S32：使用TBST磁珠保存液将所述包被好的复合物清洗3-5次，得到一抗-微球复合物；

所述TBST磁珠保存液中含有质量分数为2-5%的表面活性剂。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述脱盐一抗与所述活化微球混合的质量比为(0.5-0.7):2。

8.一种多重标志物液态芯片的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S10：对一抗进行脱盐处理，得到脱盐一抗；

S20：对微球进行活化操作，得到活化微球；

S30：将所述脱盐一抗与所述活化微球进行交联，得到一抗-微球复合物；

S40：对二抗进行脱盐处理，得到脱盐二抗；

S50将NHS-biotin溶液与所述脱盐二抗混合，室温避光震荡反应4-6h，得到二抗-生物素复合物。

9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述NHS-biotin溶液的溶剂为DMSO；所述NHS-biotin溶液的浓度为45-55μg/μL；所述NHS-biotin溶液与所述脱盐二抗混合的质量比为(16-18):(0.7-0.8)。

10.一种多重标志物液态芯片，其特征在于，由如权利要求8或9所述的方法制备得到，包含一抗-微球复合物和二抗-生物素复合物。