[发明专利]固相金属离子螯合剂、其制备方法和应用

说明书

本发明公开了固相金属离子螯合剂、其制备方法和应用，涉及螯合剂技术领域。固相金属离子螯合剂由乙二胺四乙酸酐和葡聚糖进行酯化接枝反应而得；优选地，以羧基基团所占百分比计，接枝率为20‑30％。制备得到的产物能够有效地除去生物样本中的金属离子，能够有效提升土壤样本特别是极端土壤样本中核酸的活性，可以在土壤DNA提取中得到应用。

技术领域

本发明涉及螯合剂技术领域，且特别涉及固相金属离子螯合剂、其制备方法和应用。

背景技术

土壤微生物是土壤生态系统的重要组份之一，几乎所有的土壤过程都直接或间接地与土壤微生物有关。当前土壤微生物宏基因组是土壤微生物研究的有力手段，该方法灵敏度高，准确性，使用该方法的前提是能够获得一定浓度的高质量土壤基因组DNA。

然而，土壤样本具有多样性和复杂性，这导致土壤DNA的提取一直是核酸提取领域的难点。富营养土壤中，往往由于腐殖酸的影响增大其核酸提取过程的难度；又如贫瘠土壤微生物含量低，有的土壤核酸，这都一定程度上增大了核酸提取过程的难度。此外，在极端环境土壤样本中，比如矿区土壤样本，存在着多种金属离子对裂解微生物过程中酶的活性影响较大，裂解过程中加入EDTA后，可以螯合多种金属离子，但同时对多数酶(比如常用的复合酶蜗牛酶中的纤维素酶和蛋白酶等)的活性也产生不利影响。

因此，开发一种高效固相金属螯合剂，可方便除去样本中金属离子，特别是对于这种极端土壤样本核酸的提取是非常必要的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种固相金属离子螯合剂及其制备方法，旨在有效去除土壤生物样本中的金属离子，提高土壤样本核酸提取的活性。

本发明的另一目的在于提供上述固相金属离子螯合剂在土壤DNA提取中的应用。

本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。

本发明提出了一种固相金属离子螯合剂，其由乙二胺四乙酸酐和葡聚糖进行酯化接枝反应而得；优选地，以羧基基团所占百分比计，接枝率为20-30％。

本发明还提出一种固相金属离子螯合剂的制备方法，其通过乙二胺四乙酸酐和葡聚糖进行酯化接枝反应。

本发明还提出上述固相金属离子螯合剂在土壤DNA提取中的应用。

本发明实施例提供一种固相金属离子螯合剂及其制备方法的有益效果是：其通过乙二胺四乙酸酐和葡聚糖进行酯化接枝，制备得到的产物能够有效地除去生物样本中的金属离子，能够有效提升土壤样本特别是极端土壤样本中核酸的活性，可以在土壤DNA提取中得到应用。

需要指出的是，羧酸基团的接枝率过高或过低都会影响螯合剂去除金属离子的能力，将其控制在指定范围内为宜。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为荧光定量PCR图。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

下面对本发明实施例提供的固相金属离子螯合剂、其制备方法和应用进行具体说明。

本发明实施例提供了一种固相金属离子螯合剂的制备方法，具体包括如下步骤：

S1、酯化接枝反应