[发明专利]一种6-氨基青霉烷酸的制备方法

权利要求书

1.一种6-氨基青霉烷酸的制备方法，其特征在于：利用青霉素发酵液经过前处理工序获得处理后的青霉素发酵液；

（1）在处理后的青霉素发酵液中加入青霉素酰化酶进行裂解反应，反应结束后得到包含6-氨基青霉烷酸和苯乙酸的混合液；

（2）将混合液经过纳滤浓缩得到6-氨基青霉烷酸和苯乙酸的浓缩混合溶液；

（3）将6-氨基青霉烷酸和苯乙酸的浓缩混合溶液进行脱色处理后，使用树脂将浓缩混合溶液中的苯乙酸吸附分离，得到6-氨基青霉烷酸的水溶液；

（4）调节6-氨基青霉烷酸的水溶液的pH值至6-氨基青霉烷酸的等电点即可得到6-氨基青霉烷酸结晶，过滤洗涤干燥，得到6-氨基青霉烷酸，

所述前处理工序包括破壁工序、释放工序、提取工序和分离工序；

所述破壁工序指在具有青霉素菌体的发酵液中加入几丁质酶进行破壁处理，获得具有青霉菌的原生质体的处理液；

所述释放工序指将三氯乙酸加入处理液中，利用三氯乙酸进入原生质体并将原生质体内结合青霉素的结合蛋白进行变性清除，获得清除结合蛋白的青霉素；

所述提取工序将发酵混合液温度提升到55-60℃，将清除结合蛋白的青霉素从破壁处理的细胞中提取出来；

所述分离工序指将利用超滤去除含有青霉菌的原生质体，获得青霉素滤液。

2.根据权利要求1所述的6-氨基青霉烷酸的制备方法，其特征在于所述青霉素发酵液由产黄青霉发酵获得。

3.根据权利要求1所述的6-氨基青霉烷酸的制备方法，其特征在于所述裂解反应的温度为22-28℃，反应过程中发酵液的pH为7.2-8.2，裂解反应的反应时间为1-2h。

4.根据权利要求1所述的6-氨基青霉烷酸的制备方法，其特征在于所述青霉素滤液的青霉素浓度400000-500000u/mL。

5.根据权利要求1所述的6-氨基青霉烷酸的制备方法，其特征在于所述超滤中过滤膜的截留分子量为5000—15000Da。

6.根据权利要求1所述的6-氨基青霉烷酸的制备方法，其特征在于所述破壁工序反应温度为35-45℃，所述三氯乙酸的添加量为处理液质量的0.2-0.5‰。

7.根据权利要求1所述的6-氨基青霉烷酸的制备方法，其特征在于所述含有青霉素的悬浊混合液为青霉素溶液和内容物中含有变性蛋白的青霉素菌体原生质体的混合物。