[发明专利]一种利用分光光度法测定多酚化合物与金属离子络合反应化学计量比的方法

权利要求书

1.一种利用分光光度法测定多酚化合物与金属离子络合反应化学计量比的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)分别配置1-10mM等摩尔浓度的多酚溶液和金属离子溶液及反应缓冲液；

(2)分别向1mL比色皿中每次加入0、2、4、6、……20μL金属离子溶液及20、18、16、14、……、0μL多酚溶液，使得每次加入的金属离子溶液和多酚溶液总体积保持为20μL不变，然后补加反应缓冲液至1mL，充分混合，室温放置1-2min；

(3)每次混合后，用分光光度计测定反应溶液在330nm下的吸光度值，以反应缓冲液为空白；

(4)收集每次测定的吸光度值，利用MatLab软件进行四项式曲线模拟，得到以[M]/[M+PP]为横坐标，吸光度值为纵坐标的四项式模拟曲线图，曲线最高点对应的X值，即为络合物的化学计量比，其中[M]为金属离子的摩尔浓度，[M+PP]为金属离子和多酚化合物的总摩尔浓度。

2.按照权利要求1的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的反应缓冲液为磷酸盐、柠檬酸盐、碳酸盐、醋酸盐、巴比妥酸盐、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等缓冲液。

3.按照权利要求1的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的反应温度为0-40℃。

4.按照权利要求1的方法，其特征在于，步骤(4)中所述的MatLab软件进行四项式曲线模拟方程y(x)为：

其中：k为级数，ɑ为曲线与y轴相交的点的数值，y为混合溶液的吸光度值，x为金属离子浓度占总浓度的摩尔比例，总浓度为金属离子浓度+多酚化合物浓度。