[发明专利]一种检测SARS-CoV-2的引物和探针及其试剂盒

权利要求书

1.一种检测SARS-CoV-2的引物和探针，其特征在于：包括引物探针组合如下：

如SEQ ID NO.1所示的SARS-CoV-2N基因的上游引物；

如SEQ ID NO.2所示的SARS-CoV-2N基因的下游引物；

如SEQ ID NO.3所示的SARS-CoV-2N基因的特异性探针；

如SEQ ID NO.4所示的SARS-CoV-2ORF1ab基因的上游引物；

如SEQ ID NO.5所示的SARS-CoV-2ORF1ab基因的下游引物；

和如SEQ ID NO.6所示的SARS-CoV-2ORF1ab基因的特异性探针。

2.根据权利要求1所述的检测SARS-CoV-2的引物和探针，其特征在于，

SEQ ID NO.1～2所示引物对扩增的片段如SEQ ID NO:7所示；

SEQ ID NO.4～5所示引物对扩增的片段如SEQ ID NO:8所示。

3.根据权利要求1所述的检测SARS-CoV-2的引物和探针，其特征在于，所述探针的3’端连接淬灭基团，5’端连接荧光基团；其中：

如SEQ ID NO.3所示探针的5’端连接FAM荧光基团；

如SEQ ID NO.6所示探针的5’端连接ROX荧光基团。

4.权利要求1～3任一项所述的引物和探针在制备检测SARS-CoV-2的试剂盒中的应用。

5.一种SARS-CoV-2的检测试剂盒，其包括权利要求1～3任一项所述的引物和探针及Real time PCR反应试剂。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，所述Real time PCR反应试剂包括：dNTPs、M-MLV酶、Taq酶、MgCl₂。

7.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，还包括阴性对照和阳性对照；其中，所述阴性对照为无菌水，阳性对照为人工合成的浓度1×10⁶Copies/ml的假病毒。

8.一种非诊断或治疗目的检测SARS-CoV-2的方法：采用权利要求1～3任一项所述的引物和探针对样品进行检测Real time PCR，根据检测的Ct值判断样品是否被SARS-CoV-2感染；

所述判断包括：

SEQ ID NO.3与SEQ ID NO.6所示通道CT值＞40或者无CT值，报告检测结果为阴性；

SEQ ID NO.3与SEQ ID NO.6所示两个探针通道任意一个或两个通道的CT值≤40，报告为SARS-CoV-2阳性。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，

所述Real time PCR的反应体系包括：

所述Real time PCR的反应程序包括：