[发明专利]虾血细胞虹彩病毒LAMP检测引物组、试剂盒及方法

说明书

本发明公开了一种虾血细胞虹彩病毒LAMP检测引物组、试剂盒及方法，所述引物组包括引物OF、OR、IF、IR、LF、LR，其中，OF：5’‑AATGTTGGGAAAGTTTGCA‑3’；OR：5’‑CCTTTCCTCGTTGGAACAA‑3’；IF：5’‑CATCTAACACCATCTCCCGCCTCTGATTACGGGTAAAAAGGC‑3’；IR：5’‑AGTCATGGATGAACCAAATGCTGACGAGCCCAATACGAATCG‑3’；LF：5’‑CCAATTCGGGACTTGCAG‑3’；LR：5’‑GAACGTTAAAGGGTCTCACG‑3’；本发明不仅可以对虾血细胞虹彩病毒DNA进行特异性扩增，还可以对虾血细胞虹彩病毒产生的RNA进行特异性逆转录，解决现有技术中虾血细胞虹彩病毒感染初期病毒DNA含量往往低于检测产品检出限而出现漏检的问题，通过同时检测虾血细胞虹彩病毒DNA和虾血细胞虹彩病毒大量转录产生的与其序列相同的RNA，不仅提高了虾血细胞虹彩病毒的正确检出率，缩短了检测时间，而且特异性强、灵敏度高。

技术领域

本发明涉及生物病毒检测技术领域，尤其涉及一种虾血细胞虹彩病毒LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法。

背景技术

近年来，在东亚、东南亚和欧洲地区，由虹彩病毒引起的鱼类疾病给水产养殖业造成重大的经济损失，严重阻碍了鱼类养殖业的健康发展，在国内外受到愈来愈大的关注。虹彩病毒科(Iridoviridae)共分为5个病毒属，即虹彩病毒属(Iridovirus)、绿虹彩病毒属(Chloriridovirus)、淋巴囊肿病毒属(Lymphocystivirus)、蛙病毒属(Ranavirus)和细胞肿大病毒属(Megalocytivirus)，主要感染无脊椎动物和低等脊椎动物。2017年，中科院黄海研究所科研人员在浙江省一批严重发病死亡的凡纳滨对虾样品中分离鉴定到一种新病毒，经过组织病理学研究和基因组学测序发现，这种新病毒属于虹彩病毒科，但不属于虹彩病毒科下已经建立的五个属，后将其命名为虾血细胞虹彩病毒(SHIV)。

由于虾感染虾血细胞虹彩病毒(SHIV)后出现的主要症状与感染红螯螯虾虹彩病毒(CQIV)、樱花虹彩病毒(SIV)、虾白斑综合症病毒(WSSV)等极为相似，如何检测感染症状是否由虾感染虾血细胞虹彩病毒(SHIV)引起，进而为后续的防控、治疗以及采取具有针对性的措施，是本领域技术人员需要解决的技术问题。

其中，公布号为CN108950067A的发明专利申请公开了一种检测对虾虹彩病毒的LAMP引物组、试剂盒及其方法，该LAMP引物组包括一对外引物、一对内引物和一对环引物，上述LAMP检测试剂盒虽然可以对对虾虹彩病毒进行特异性扩增，但是存在以下技术问题：感染初期病毒DNA含量低于检测产品检出限的样品时，容易出现漏检。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种虾血细胞虹彩病毒LAMP检测引物组。

本发明的另一个目的旨在提供一种虾血细胞虹彩病毒RT-LAMP检测试剂盒。

本发明的另一个目的旨在提供一种虾血细胞虹彩病毒RT-LAMP检测方法。

通过所述对虾血细胞虹彩病毒LAMP检测引物、试剂盒及方法完成对虾血细胞虹彩病毒的快速检测。

本发明的目的旨在提供一种虾血细胞虹彩病毒LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法，同时检测虾血细胞虹彩病毒DNA以及由虾血细胞虹彩病毒DNA转录产生与其序列相同的RNA，降低漏检的风险。

为了实现本发明的目的，本发明采用的一种技术方案如下：

一种虾血细胞虹彩病毒LAMP检测引物组，其特征在于：所述引物组包括0F、0R、IF、IR、LF、LR，其中：

0F：5’-AATGTTGGGAAAGTTTGCA-3’；

0R：5’-CCTTTCCTCGTTGGAACAA-3’；