[发明专利]一种抗草甘膦转基因籼稻的制备方法

权利要求书

1.一种抗草甘膦转基因籼稻的制备方法，其特征在于，将籼稻的愈伤组织放置于抗草甘膦培养基中进行培育。

2.根据权利要求1所述的抗草甘膦转基因籼稻的制备方法，其特征在于，所述抗草甘膦培养基的组分包括以下重量份的组分：

抗草甘膦黑麦草愈伤组织10-15重量份、培养基悬浮液30-50重量份、中草药制剂5-10重量份、改性蛋白质2-4重量份、营养剂0.5-1重量份、抗菌剂0.5-1重量份、PH调节剂0.5-1重量份。

3.根据权利要求2所述的抗草甘膦转基因籼稻的制备方法，其特征在于，所述抗草甘膦培养基的组分包括以下重量份的组分：

抗草甘膦黑麦草愈伤组织13重量份、培养基悬浮液45重量份、中草药制剂8重量份、改性蛋白质3重量份、营养剂0.8重量份、抗菌剂0.8重量份、PH调节剂0.8重量份。

4.根据权利要求2所述的抗草甘膦转基因籼稻的制备方法，其特征在于，所述抗草甘膦培养基的制备方法包括以下步骤：

S1：制备抗草甘膦愈伤组织:取黑麦草的愈伤组织，将黑麦草的愈伤组织放置于含有草甘膦的培养基中培育3-5d，加入PH调节剂控制PH值为6-7，完成后得到抗草甘膦黑麦草愈伤组织；

S2：制备培养基悬浮液：取200μL新鲜的悬浮液，3000rpm离心20s，60°C水浴热击5min，然后转入0°C冰浴2min后，得到培养基悬浮液，按重量份将培养基悬浮液加入培养基中；

S3：制备中草药制剂，按重量份将中草药制剂加入培养基悬浮液中，混合均匀，并用移液枪吸去表面多余的中草药制剂，常温下静置30-90min，完成后备用；

S4；制备改性蛋白质，将改性蛋白质按重量份加入培养基悬浮液中；

S5：按重量份依次加入营养剂、抗菌剂和PH调节剂，与改性蛋白质一起混合均匀即可；

S6：将抗草甘膦黑麦草愈伤组织加入培养基中即可完成。

5.根据权利要求4所述的抗草甘膦转基因籼稻的制备方法，其特征在于，所述PH调节剂为柠檬酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、磷酸中的一种或几种。

6.根据权利要求4所述的抗草甘膦转基因籼稻的制备方法，其特征在于，所述中草药制剂包括以下重量份的组分：

当归7重量份、枸杞5重量份、田七3重量份、甘草5重量份、薰衣草2重量份、茉莉花0.5重量份、宁香草0.8重量份、何首乌1重量份、党参1重量份。

7.根据权利要求4所述的抗草甘膦转基因籼稻的制备方法，其特征在于，所述中草药制剂的制备方法包括以下步骤：

S1:按重量份取原料，原料包括：当归、枸杞、田七、甘草、薰衣草、茉莉花.、宁香草、何首乌、党参，将原料清洗干净，晾干备用；

S2：将当归、枸杞、田七放入反应瓮，加水升温，水加至刚末过药材，升温至150℃，至药液浓缩至20-30重量份为止，静置冷却，得到中药初液；

S3：将何首乌、党参、甘草放入反应瓮内，加水升温，水加至刚末过药材，升温至110℃，至药液浓缩至50-60重量份为止，开始降温至温度为60-80℃，加入薰衣草、茉莉花、宁香草后继续熬制5-6h，室温下冷却，过滤掉药渣，得到混合药液；

S4：将中药初液与混合药液混合，搅拌均匀即可制得中草药制剂。

8.根据权利要求4所述的抗草甘膦转基因籼稻的制备方法，其特征在于，所述改性蛋白质的制备方法包括以下步骤：

S1：取新鲜豆浆倒入锅中加热煮沸，将煮沸的豆浆倒入不锈钢托盘中，将托盘放入冰箱，静置；

S2：待豆浆表面自然凝结成一层蛋白质薄膜，用镊子镊取得到蛋白质薄膜；

S3：将蛋白质薄膜和质量分数为10%的氢氧化钠溶液混合后装入研磨罐中，研磨20～30min；

S4：研磨结束后用浓度为1mol/L盐酸调节pH至中性，得到蛋白质分散液；

S5：将蛋白质分散液和硝酸铜以及硫酸铁混合后放入反应釜中，在常温下搅拌反应，得到改性蛋白质。