[发明专利]一种人γ-干扰素病毒载体及其应用

说明书

本发明提供了一种人γ‑干扰素病毒载体及其应用，属于生物医药技术领域。本发明采用改造后的人γ‑干扰素序列制备人γ‑干扰素病毒载体，所述的人γ‑干扰素病毒载体具有更好的表达活性及生物学活性，可用于病毒性疾病、肿瘤等疾病的治疗和/或预防，为病毒性疾病、肿瘤等疾病的治疗和/或预防提供了新的思路。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种人γ-干扰素病毒载体及其应用。

背景技术

干扰素(interferons，IFNs)是多功能细胞因子家族成员之一，是一类高活性、多功能的分泌型糖蛋白，具有抗增殖、抗病毒、免疫调节和抗肿瘤等作用。根据其基因序列、染色体定位和受体特异性等特点可分为I型、II型和III型IFNs。其中，II型干扰素只有1种，即IFNγ。IFNγ的细胞表面受体为IFNGR(interferon gamma receptor)，由IFNGR1和IFNGR2两个亚基组成。IFNγ主要由浆细胞样树突细胞(plasmacytoid dendritic cells，pDC)生成。在抗肿瘤方面发挥重要作用的为I型和II型IFNs，而II型IFNs相比于I型IFNs毒副作用较小，在抗病毒和抗肿瘤方面具有更广泛的应用前景。

IFNγ主要通过与细胞表面受体的结合，诱导病毒感染细胞产生多种抗病毒蛋白，使细胞内产生抗病毒状态而发挥抗病毒作用，其抗病毒作用是非特异性的。IFNγ主要的效应分子有双链RNA依赖的蛋白激酶R(Double-stranded RNA dependent protein kinase，PKR)、Mx、2’-5’寡腺苷酸合成酶(2’-5’OAS)/核糖核酸酶L(RNase L)系统等。PKR是一种丝氨酸/苏氨酸激酶，在与dsRNA结合后被激活，活化的PKR可使蛋白合成起始因子eIF-2及核因子抑制因子I_kB磷酸化，从而抑制病毒和细胞蛋白的合成，起到抗病毒的作用；Mx能够通过干扰某些负链病毒核酸片段向细胞内转运及某些病毒蛋白的功能而抑制病毒的增殖；2’-5’寡腺苷酸合成酶能够使ATP聚合为2’-5’寡腺苷酸，激活核糖核酸酶L降解ssRNA，从而干扰病毒复制。近年来还发现一些其他的干扰素诱导基因(Interferon-stimulatedgenes，ISGs)，如p56、p54、phospholipid scramblase 1、TRAIL/APO2L、ISG12、GBP1、ISG20、XAF1、NOS等，它们通过不同的抗病毒机制而发挥抗病毒作用，如NOS使半胱氨酸、酪氨酸亚硝基化，从而干扰病毒蛋白二硫键的形成；ISG20能够特异性地降解病毒RNA。在诱导效应因子表达的同时，由于IFNγ能够提高细胞表面MHC分子的表达，增强免疫活性细胞对病原体的杀伤作用，从而协同促进了机体对病毒感染细胞的杀灭，而使机体处于抗病毒状态。虽然各种类型的干扰素均能介导细胞对病毒感染的反应，但IFNγ的免疫调节活性在协调免疫反应和确定机体长期的抗病毒状态中发挥更为重要的作用。

另一方面，IFNγ还能够通过多种机制发挥复杂的抗肿瘤作用，比如①通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡，发挥直接的抗肿瘤作用；②通过抑制肿瘤血管生成，发挥间接的抗肿瘤作用；③通过激活机体免疫系统杀伤肿瘤细胞，发挥间接的抗肿瘤作用。

专利CN1552850A公开了一种重组人γ-干扰素腺病毒，通过基因重组技术使人γ-干扰素基因与腺病毒载体发生重组，利用复制缺陷型腺病毒载体将γ-干扰素引入机体组织细胞使人γ-干扰素蛋白在体内稳定表达，但所述重组人γ-干扰素腺病毒抗病毒作用较弱。

专利CN108064176A公开了一种用于治疗肿瘤疾病的含有RNA的组合物，所述的含有RNA的组合物包括γ-干扰素。

因此，亟需开发一种抗病毒与肿瘤治疗效果更好的人γ-干扰素病毒载体。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种人γ-干扰素病毒载体及其应用。本发明通过对人γ-干扰素序列进行优化，制备人γ-干扰素病毒载体，提升了其抗病毒与抗肿瘤的功能，从而更好的预防和/或治疗相关疾病。