[发明专利]猪星状病毒的多重RT-PCR引物组、试剂盒及应用在审
申请号: | 202110237220.6 | 申请日: | 2021-03-03 |
公开(公告)号: | CN112831606A | 公开(公告)日: | 2021-05-25 |
发明(设计)人: | 黄伟坚 | 申请(专利权)人: | 广西大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 广西南宁公平知识产权代理有限公司 45104 | 代理人: | 蓝文苑 |
地址: | 530004 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 星状 病毒 多重 rt pcr 引物 试剂盒 应用 | ||
1.用于检测猪星状病毒的多重RT-PCR引物组,其特征在于,包括五对特异性引物,分别是引物PAstV1-F和PAstV1-R、引物PAstV2-F和PAstV2-R、引物PAstV3-F和PAstV3-R、引物PAstV4-F和PAstV4-R、引物PAstV5-F和PAstV5-R,它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1至SEQ.ID.No.10的碱基序列。
2.用于检测猪星状病毒的多重RT-PCR试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的多重RT-PCR引物组。
3.根据权利要求2所述的用于检测猪星状病毒的多重RT-PCR试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括5×buffer、dNTPMix、M-MLVReverseTranscriptae、RNA酶抑制剂、RNA、TarakaEx×Taq、10×ExTaqBuffer、dNTPMix、TemplatecDNA和ddH2O。
4.权利要求1所述的用于检测猪星状病毒的多重RT-PCR引物组在RT-PCR扩增中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述RT-PCR扩增反应体系为多重RT-PCR引物组各0.8μmol/L、TarakaEx×Taq0.25μL、10×ExTaqBuffer5μL、dNTPMix4μL、cDNA模板各1μL、灭菌后ddH2O补齐至50μL。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于,所述RT-PCR扩增反应条件为98℃变性10s,55℃退火30s,72℃延伸1min,30个循环。
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