[发明专利]核酸合成系统及方法有效
申请号: | 202110205946.1 | 申请日: | 2021-02-24 |
公开(公告)号: | CN113000003B | 公开(公告)日: | 2023-04-07 |
发明(设计)人: | 李大为 | 申请(专利权)人: | 苏州英赛斯智能科技有限公司 |
主分类号: | B01J19/24 | 分类号: | B01J19/24;B01J19/00;B01J4/00;C07H1/00;C07H21/00 |
代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 殷海霞 |
地址: | 215000 江苏省苏州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核酸 合成 系统 方法 | ||
1.一种核酸合成方法,其特征在于:采用核酸合成系统,所述核酸合成系统包括:第一进样管路、第二进样管路、三通阀、循环切换阀、合成柱位管路及出样管路;
所述第一进样管路、第二进样管路经三通阀汇合后与合成柱位管路连通;
所述循环切换阀设置在第二进样管路、三通阀之间,用于两种管路状态的切换连通:循环状态和加料状态;
所述循环状态下所述合成柱位管路经所述循环切换阀内部循环连通;
所述加料状态下所述第二进样管路经循环切换阀与合成柱位管路连通,所述合成柱位管路再经循环切换阀与出样管路连通;
所述核酸合成方法包括以下步骤:
S1、将循环切换阀切换至加料状态,在第一进样管路、第二进样管路中依次通入所需核酸碱基物料和多种催化反应试剂对系统进行清洗;
S2、清洗完成后依次在第一进样管路中通入催化反应试剂中的脱三苯甲基试剂、在第二进样管路中加入催化反应试剂中的碱基活化试剂、在第一进样管路中通入核酸碱基物料,将循环切换阀切换至循环状态,对核酸碱基物料循环合成;
S3、合成完成后,再次将循环切换阀切换至加料状态,依次在第一进样管路中通入催化反应试剂中的加帽试剂、在第二进样管路中加入催化反应试剂中的氧化试剂,完成一个核酸碱基物料的脱三苯甲基—活化—偶联—加帽—氧化的合成过程;
S4、重复上述步骤S2和S3,每循环一次加入一个核酸碱基物料,完成核酸基因序列的多个核酸碱基物料的合成。
2.根据权利要求1所述的核酸合成方法,其特征在于:所述第一进样管路包括第一柱塞泵、至少一个进样切换阀及连通管道,所述进样切换阀包括多个进液口和一个出液口,多个所述进液口分别连通有不同的试剂管路及物料管路,所述出液口通过连通管道与三通阀连通,所述第一柱塞泵设置在连通管道上。
3.根据权利要求1所述的核酸合成方法,其特征在于:所述第二进样管路包括第二柱塞泵、至少一个进样切换阀及连通管道,所述循环切换阀设在连通管道上,所述进样切换阀包括多个进液口和一个出液口,多个所述进液口分别连通有不同的试剂管路及物料管路,所述出液口通过连通管道与三通阀连通,所述第二柱塞泵设置在连通管道上,所述第二柱塞泵设置在三通阀与循环切换阀之间。
4.根据权利要求2或3所述的核酸合成方法,其特征在于:与所述进样切换阀的进液口连通的试剂管路和物料管路交叉间隔设置。
5.根据权利要求1所述的核酸合成方法,其特征在于:所述合成柱位管路包括与三通阀及循环切换阀连通的连通管道、至少一个合成柱位、旁路和柱位阀,所述柱位阀切换合成柱位和旁路分别接入到连通管道中。
6.根据权利要求1所述的核酸合成方法,其特征在于:所述出样管路包括出样收集阀和与循环切换阀连接的连通管道,所述出样收集阀包括一个进液口和多个出液口,多个所述出液口分别连通有不同的试剂管路及物料管路。
7.根据权利要求1所述的核酸合成方法,其特征在于:还包括设置在出样管路上的UV检测器、电导率检测器和阻尼器。
8.根据权利要求1所述的核酸合成方法,其特征在于:所述合成柱位管路包括合成柱位、旁路和柱位阀,所述合成柱位和旁路通过柱位阀切换接入到系统中,在对系统进行清洗时,分别对合成柱位、旁路均进行清洗,在进行加料和循环合成的过程中,所述合成柱位接入到系统中,在合成柱位内完成脱三苯甲基—活化—偶联—加帽—氧化的合成过程。
9.根据权利要求1所述的核酸合成方法,其特征在于:所述合成柱位管路包括多个合成柱位,多个所述合成柱位分别通过柱位阀依次接入到系统中。
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